[发明专利]一种靶向金银合金纳米笼的药物递送系统的制备方法及应用

权利要求书

1.一种靶向金银合金纳米笼的药物递送系统，其特征在于，该系统是由靶向金银合金纳米笼基因载体负载基因药物形成的药物转运系统，其中，靶向金银合金纳米笼基因载体和基因药物的质量比为（1~12）×10⁶：1，所述的金银合金纳米笼基因载体是将靶向肿瘤分子叶酸和阳离子聚合物聚乙烯亚胺以化学键和静电作用的方式连接在金银合金纳米笼的表面构成；

所述靶向金银合金纳米笼的药物递送系统的制备方法，包括以下步骤：

1）将8~10mg叶酸、7~8mg 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、4~5mg N-羟基琥珀酰亚胺置于20ml pH值为4~7的PBS缓冲液中，室温磁力搅拌2~12h，得活化的叶酸溶液；

2）称取带有活性基团的PEG 40~60mg加入到活化的叶酸溶液中，用0.1MNaOH溶液调pH值为7~9，室温磁力搅拌12~24h，用分子量为3500Da的透析袋透析48~72h，除去未反应的叶酸，得带有活性基团PEG的SH-PEG-NH₂反应溶液；

3)取金银合金纳米笼200~300ml加入到步骤2）制备的反应溶液中，搅拌混合均匀，用0.1MNaOH溶液调溶液pH值为7~9，室温磁力搅拌4~48h，12000r/min离心15~30min，得沉淀物；将沉淀物再加入到步骤2）制备的反应溶液中，搅拌混合均匀，用0.1MNaOH溶液调溶液pH值为7~9，室温磁力搅拌4~48h，12000r/min离心15~30min，弃去上清，得沉积物，如此重复3~5次，将沉积物用超纯水分散，得PEG化的靶向金银合金纳米笼溶液；

4）称取含有巯基的小分子化合物1~5mg溶于乙醇2~10ml中，加入到步骤3）制备的PEG化的靶向金银合金纳米笼溶液中，室温磁力搅拌4~24h混合均匀，8000~12000r/min离心15~30min，弃去上清液，得沉积物，将沉积物用超纯水重新分散；然后加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐2~5mg、N-羟基琥珀酰亚胺1~4mg，室温搅拌4~24h，再加入含有20~60mg的聚乙烯亚胺水溶液2~8ml，用1.2M稀盐酸调溶液pH值为6~7，室温搅拌0.5~24h，12000r/min离心15~30min，弃去上清，得沉淀，沉淀再重新分散于超纯水中，在12000r/min离心15~30min，如此重复离心3~5次，即得靶向金银合金纳米笼基因载体；

所述的巯基小分子化合物是11- 巯基烷酸、硫辛酸、巯基乙酸、巯基丙酸中的一种；

5)将上述所制得的靶向金银合金纳米笼基因载体与基因药物以质量比为（1~12）×10⁶︰1，将靶向金银合金纳米笼基因载体的水溶液在涡旋的状态下，逐滴加入到基因药物水溶液中，涡旋30~120s，室温孵育30~60min，即成靶向金银合金纳米笼的药物递送系统。

2.根据权利要求1所述的靶向金银合金纳米笼的药物递送系统，其特征在于，所述的聚乙烯亚胺为Mw25000的bPEI、Mw25000的LPEI或Mw1800的bPEI中的一种；所述的基因药物为质粒DNA、siRNA、microRNA或lncRNA中的一种；所述的靶向金银合金纳米笼的粒径为50~150nm。