[发明专利]一种毛细管电泳快速检测碱基不匹配数量的方法有效
| 申请号： | 201510559851.4 | 申请日： | 2015-09-06 |
| 公开（公告）号： | CN105181778B | 公开（公告）日： | 2017-12-05 |
| 发明（设计）人： | 王建浩;秦玉琴;滕一万;陈瑶;李进晨;蒋鹏举;邱琳;王车礼;杨丽;张晨澄;樊杰;柳丽 | 申请（专利权）人： | 常州大学 |
| 主分类号： | G01N27/447 | 分类号： | G01N27/447 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 213164 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 毛细管 电泳 快速 检测 碱基 匹配 数量 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种毛细管电泳快速检测碱基不匹配数量的方法，其特征在于：
(1)设计3’端偶联荧光染料的DNA，形成荧光探针，
所述的荧光染料为6-FAM，
所述荧光探针中DNA为5’-GGT TGG TGT GGT TGG-3’；
(2)设计若干与步骤(1)所述DNA片段具有不同数量不匹配碱基的互补DNA；
(3)分别将若干互补DNA与荧光探针在毛细管内杂交，经荧光检测，计算峰面积比S1/STotal，其中，S1为荧光探针峰面积，STotal为所有峰面积，得到峰面积比与不匹配碱基数的标准曲线，待测样品与荧光探针毛细管内杂交后，计算其电泳峰面积比S1/STotal，对照标准曲线确定待测样品的不匹配碱基数。
2.根据权利要求1所述的毛细管电泳快速检测碱基不匹配数量的方法，其特征在于：所述互补DNA与荧光探针在毛细管内的进样顺序为先进电泳迁移速度慢的荧光探针，再进电泳迁移速度快的互补DNA，所述互补DNA与荧光探针进样时间差保证两者能在毛细管内杂交。
3.根据权利要求1所述的毛细管电泳快速检测碱基不匹配数量的方法，其特征在于：所述的毛细管采用内径75μm，全长60cm，有效长度35cm的石英毛细管，通过18kV的高压电源使待测样品及缓冲液在毛细管内流动。
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