[发明专利]一种细胞生产(S)- 4-甲苯丙酸甲酯的方法

权利要求书

1.一种近平滑假丝酵母细胞生物催化制备(S)-3-(3-氟苯基)-3-羟基丙酸甲酯的方法，其特征在于反应罐中加入磷酸盐缓冲液，pH为7.0，加入底物3-氟苯甲酰乙酸甲酯，使底物3-氟苯甲酰乙酸甲酯添加量为80-90g/L，麦芽浸膏22-26g，直链的10碳醇聚氧乙烯醚为21-224g/L，木糖36-39g/L、蔗糖25-28g/L、异丙醇5-6%V/V，121℃高压灭菌30分钟；冷却至29-30℃时，加入湿酵母细胞使浓度为80-84g/L，通气比为0.15-0.16V/（V分钟），进行生物催化反应，反应时间为60-64小时；反应结束后，滤出细胞，用乙酸乙酯萃取反应液，蒸出乙酸乙酯，得到产物(S)-3-(3-氟苯基)-3-羟基丙酸甲酯，反应转化率98-99％，产品收率96-97％，对映体过量率98.5-99％。

2.权利要求1所述的方法，其特征在于湿酵母细胞制备过程如下：近平滑假丝酵母ATCC28473，经斜面、摇瓶、种子罐培养得到种子液；发酵罐加入培养液，121℃高压灭菌30分钟，冷却至29-30℃，将近平滑假丝酵母种子液接种至发酵罐，接种比例为6-6.5％，通气比为0.7-0.9V/（V分钟），29-30℃培养44-48小时，用过滤式离心机离心得到湿酵母细胞，用作生物催化反应催化剂；发酵罐中培养液成份为：葡萄糖37-44g/L,木糖7-8g/L，玉米胚芽粉10-12g/L，酵母提取物4-5g/L,(NH₄)₂HPO₄12-15g/L,KH₂PO₄6.5-7.5g/L.MgSO₄.7H₂O　0.7-0.8g/L,NaCl　0.08-0.1g/L;pH6.8。