[发明专利]一种产朊假丝酵母细胞生物催化制备(S)-3-羟基-3-(4-甲基苯)丙酸甲酯的方法在审
申请号: | 201510561189.6 | 申请日: | 2015-09-07 |
公开(公告)号: | CN105463033A | 公开(公告)日: | 2016-04-06 |
发明(设计)人: | 刘均洪;冀雪 | 申请(专利权)人: | 青岛科技大学 |
主分类号: | C12P7/62 | 分类号: | C12P7/62;C12R1/72 |
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地址: | 266042 山东省青*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 产朊假丝 酵母 细胞 生物 催化 制备 羟基 甲基 丙酸 方法 | ||
1.一种产朊假丝酵母细胞生物催化制备(S)-3-羟基-3-(4-甲基苯)丙酸甲酯的方法,其特征在于反应罐中加入磷酸盐缓冲液,pH为5.6,加入底物3-(4-甲基苯)-3-丙酸甲酯,使底物3-(4-甲基苯)-3-丙酸甲酯添加量为80-90g/L,麦芽浸膏22-26g,支链化13碳格尔伯特醇聚氧乙烯醚21-22g/L,木糖30-33g/L、蔗糖25-28g/L、麦芽糖36-41g/L、异丙醇8-10%V/V,121℃高压灭菌30分钟;冷却至28-29℃时,加入湿酵母细胞使浓度为67-71g/L,通气比为0.15-0.16V/(V分钟),进行生物催化反应,反应时间为59-64小时;反应结束后,滤出细胞,用乙酸乙酯萃取反应液,蒸出乙酸乙酯,得到产物(S)-3-羟基-3-(4-甲基苯)丙酸甲酯,反应转化率98-99%,产品收率96-97%,对映体过量率98.5-99%。
2.权利要求1所述的方法,其特征在于湿酵母细胞制备过程如下:产朊假丝酵母ATCC64882,经斜面、摇瓶、种子罐培养得到种子液;发酵罐加入培养液,121℃高压灭菌30分钟,冷却至28-29℃,将产朊假丝酵母种子液接种至发酵罐,接种比例为6-6.5%,通气比为1.7-1.8V/(V分钟),28-29℃培养39-43小时,用过滤式离心机离心得到湿酵母细胞,用作生物催化反应催化剂;发酵罐中培养液成份为:葡萄糖20-22g/L,麦芽浸膏23-25g/L,(NH4)2SO44.8-5.3g/L,KH2PO49-11g/L,MgSO4.7H2O0.3-0.4g/L,CaCl20.35-0.4g/L,硫酸铵0.2-0.25g/L,硫酸镁0.3-0.4g/L,pH为5.6。
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