[发明专利]一种总蟾毒内酯纳米立方液晶及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于药物制剂领域，涉及了总蟾毒内酯纳米立方液晶及其制备方法，更具体地说，本发明总蟾毒内酯纳米立方液晶，增加总蟾毒内酯的溶解度，实现了脂溶性药物总蟾毒内酯口服给药，避免其注射给药对机体的刺激性。

背景技术

蟾蜍为蟾蜍科动物中华大蟾蜍(Bafogararizaus)的皮，剥下之皮晒干为干蟾皮，其耳后腮及皮肤腺所分泌的白色浆液为蟾酥，性辛甘温，有毒，功能解毒散肿，通窍止痛。总蟾毒内酯作为蟾蜍的主要药效成分，具有强心，升压、抗休克、增强机体免疫力、抗肿瘤等多方面作用，其中在抗瘤方面的应用日益广泛，显示出抗肿瘤活性强，抗癌谱广等特性，能选择性地作用于肿瘤细胞，而对正常动物造血系统和免疫较高系统没有影响，对H₂₂腹水肝癌细胞，MGC803胃癌、SMMC7721肝癌，S₁₈₀腹水癌，La795肺腺癌胰腺癌，HL-60、ML1、U937、K562等人白血病细胞、HeLa上皮癌细胞、PLC/PRF/5肝癌细胞、A431表皮癌细胞等实体肿瘤均有较好的抑制作用。其主要含有蟾毒配基(resibufogenin)、蟾蜍毒素类，华蟾酥毒基(cinobufagin)、蟾毒灵(bufalin)、蟾毒它灵(Bufotalin)、日蟾毒它灵-3-半辛二酸酯(Gamabufotalin-3-hydrogenSuberate)、蟾蜍灵-3-丁二酰精氨酸酯、华蟾毒精-3-丁二酰精氨酸酯等内酯类成分。

现已有蟾酥镇痛膏、蟾酥注射液、华蟾素注射注和复方蟾皮胶囊等制剂应用于临床抗肿瘤、镇痛、利水消肿、增强机体免疫力。这些制剂抗肿瘤疗效显著，但存在有效成分含量低，杂质多，质量及临床疗效不稳定、毒副作用大等严重缺陷。经研究发现，华蟾素注射液中具抗肿瘤活性的总蟾毒内酯类成分含量极低，主要为水溶性吲哚类生物碱(如5-羟色胺、蟾蜍色胺、蟾蜍特尼、蟾蜍硫黄等)类、氨基酸等成分，而大量的内酯类有效成分损失殆尽，目前尚未有生物碱成分有抗肿瘤活性的研究报道，且临床研究认为华蟾素不良反应心律失常、局部静脉刺激反应、皮肤反应、哮喘、超敏反应等均为水溶性吲哚类生物碱成分的药理作用所致。因此，提取纯化华蟾素的重点在于富集内酯类成分和去除生物碱及其他杂质成分，特别是生物碱成分。同时总蟾蜍内酯在水溶液中溶解度低，体内半衰期短，生物利用度低，同时注射后有强烈的肌肉刺激性，这些特性极度的限制了总蟾蜍内酯的临床应用。

因此依据其作用特点与体内过程，采用现代药剂学手段设计合理的纳米立方液晶给药系统，改善总蟾蜍内酯的水溶性、减小毒副作用籍以提高药物疗效有非常重要的意义。

脂质纳米立方液晶是两亲性脂质在水中自发形成的双连续相的立方液晶的纳米分散体系，是含有水和脂质双连续相的蜂窝状结构。该体系具有独特的三维双连续网格结构，内含互相连通的亲水通道，可以增溶或分散不同极性和尺寸的药物分子，具有较好的生物相容性，所含有的双亲性脂质可促进药物穿透生物膜。脂质纳米立方液晶由于其独特的作用机制，可作为难溶性、口服吸收差、稳定性差、生物利用度低的药物载体，成为提高难溶性药物口服生物利用度的新工具。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种总蟾毒内酯纳米立方液晶的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：

本发明首先公开了一种总蟾毒内酯纳米立方液晶，包括以下各组分：总蟾毒内酯、脂质材料、乳化剂、纯化水。

各组分的比例为：总蟾毒内脂：(乳化剂+脂质材料)＝1:1～10；乳化剂：脂质材料＝9:100～20:100，余量为水。

优选的各组分的比例为：总蟾毒内脂：(乳化剂+脂质材料)＝1:5；乳化剂：脂质材料＝15:100，余量为水。

其中所述脂质材料为单油酸甘油脂、甘油单反油酸醋、磷脂酰乙醇胺、磷脂和植烷三醇中的一种或多种；优选为单油酸甘油脂。

所述乳化剂为泊洛沙姆407(P407)、聚乙烯醇和多肽中的一种或多种；优选为洛沙姆407。

本发明还公开了一种所述总蟾毒内酯纳米立方液晶的制备方法，包括以下步骤：

(1)将精密称取处方量的脂质材料和总蟾毒内酯溶于有机溶剂中，水浴加热，构成油相；

(2)将处方比例的乳化剂溶于定量水中，水浴加热到与油相相同温度，构成水相；

(3)用1mL注射器将油相缓慢匀速注入到搅拌的水相中，继续搅拌，待有机溶剂挥发完全后，形成初乳液；

(4)在搅拌条件下将初乳液缓慢倒入适量冰水中(冰浴)，继续搅拌一定时间即得总蟾毒内酯脂质纳米立方液晶。