[发明专利]一种毛竹胚乳培养的方法

说明书

技术领域

本发明涉及林木生物技术和细胞工程育种领域，特别涉及到毛竹胚乳培养的方法。

背景技术

三倍体植物通常具有生长旺盛、抗逆性强、无籽等优良性状，三倍体培育是遗传育种的重要途径。相对于传统地借助杂交创制三倍体而言，通过胚乳细胞培养再生三倍体具有周期短、效率高等优点；由于胚乳植物的染色体2/3来自母本，1/3来自父本，作为研究性状遗传规律的材料，也颇具价值；事实上，胚乳植物在形成三倍体植株的同时，可以产生大量不同倍性的混倍体和非整倍体，可为育种提供丰富的不同倍性材料。自上世纪三十年代以来，植物胚乳培养的研究成为植物育种领域的重要技术之一：

1933年，Lampe and Mills首次报道开展玉米胚乳培养的实验(参考文献1)；

1965年，Johri and Bhojwani首次获得Exocarpos cupressiformis的胚乳再生植株(参考文献2)；

此后，植物胚乳培养的研究吸引了国内外众多的科学家参与，并在众多植物上获得成功，主要有：

1978年，王大元等获得普通的三倍体植株(参考文献3)；

1981年，孙敬三获得大麦胚乳再生植株(参考文献4)；同年，桂耀林等培养猕猴桃胚乳获得再生植株(参考文献5)；

1982年，王敬驹等获得小黑麦杂种胚乳的再生植株(参考文献6)；

1990年，Gmitter等培养Citrus胚乳并获得三倍体植株(参考文献7)；

1996年，Garg等培养Acacia nilotica的胚乳实现体细胞胚胎发生获得三倍体植株(参考文献8)；

迄今许多植物种类已经成功实现胚乳培养和植株再生，特别是在麦类、玉米、水稻等农业植物取得较大的成就，但是，同为禾本科的竹类植物，迄今未见有关于其胚乳培养的报道。造成这种现象的原因主要在于：1)与每年开花结实的林木树种或者农作物不同，竹子开花周期长达数十年，开花时间难以预测，胚乳获得十分困难；2)竹子为粗放经营的林木树种，关于其开花生物学的研究比较薄弱，对开花后的受精时间、种胚发育过程也缺乏足够的了解，故而难以获得发育程度适宜的外植体；3)竹类植物以无性繁殖的方式繁衍，每年生笋长竹，人类更多地关注其笋竹产品的生产，对于其科学研究的重视不够。这些问题导致的共同后果就是竹类植物的种质创新途径匮乏，遗传学和育种学的研究显著滞后于其他植物，鉴于此种情况，本方面提供了一种毛竹胚乳培养的方法，从而为竹类植物的种质创新增添新的技术，这对推动竹子遗传育种领域的研究，具有相应的理论意义和生产价值。

主要参考文献

1.Lampe L， Mills CO.Growth and development of isolated endosperm and embryo of maize.Abstr Pap Bot Soc Boston，1933，32：235-243

2.Johri BM，Bhojwani SS.Growth responses of mature endosperm in cultures，Nature，1965，208，1345-1347

3.王大元，张进仁.从胚乳培养再生三倍体柑桔植株[J].中国科学，1978，(4).

4.孙敬三，朱至清.大麦胚乳植株的诱导及其倍性.植物学报，1981，23：262-265，

5.桂耀林，母锡金，徐廷玉，.猕猴桃胚乳培养分化出苗[J].植物杂志，1981，(6).

6.王敬驹，陆文梁，匡柏健.小黑麦杂种胚乳的离体培养研究.植物学报，1982，24：420-425.

7.Gmitter FG，Ling XB，Deng XX，1990.Induction of triploid Citrus plants from endosperm calli in vitro.Theor Appl Genet，80，785-790

8.Garg L，Bhandari NN，Rani V，Bhojwani SS，1996.Somatic embryogenesis and regeneration of triploid plants in endosperm cultures of Acacia nilotica.Plant Cell Rep，15，855-858

本发明的特点