[发明专利]精子选择方法及载体有效
申请号: | 201510567364.2 | 申请日: | 2015-09-08 |
公开(公告)号: | CN105132364B | 公开(公告)日: | 2018-12-14 |
发明(设计)人: | 徐小杨 | 申请(专利权)人: | 徐小杨 |
主分类号: | C12N5/076 | 分类号: | C12N5/076;C12M1/00 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 梁顺宜;郝传鑫 |
地址: | 510550 广东省广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 精子 选择 方法 载体 | ||
本发明公开了一种精子类型的选择方法,包括步骤:S1、提供一载体,所述载体表面为超疏水亲油表面,所述载体表面上设有一一对应的第一亲水表面收集区域及第二亲水表面收集区域;S2、将断离尾部的精子放置在所述载体的第一亲水表面收集区域内,并将所述精子的尾部放置在与所述第一亲水表面收集区域对应的第二亲水表面收集区域内;S3、检验所述第二亲水表面收集区域内的精子尾部,筛选包含目标精子表达特异蛋白的精子尾部;S4、根据包含目标精子表达特异蛋白的尾部找出所对应性状的第一亲水表面收集区域内的精子,完成精子类型的选择。本发明还公开了一种载体和基于遗传性状的精子选择方法。
技术领域
本发明涉及遗传技术领域,尤其涉及一种精子类型的选择方法、基于遗传性状的精子选择方法以及载体。
背景技术
人工辅助生殖技术中,有些性连锁的遗传疾病需要进行胚胎性别控制,目前,用于人类生殖辅助的性别控制方法是植入前遗传选择,即所谓的第三代试管婴儿技术。这一方法是在早期胚胎阶段从发育中的胚胎中抽取少量遗传物质,体外扩增后诊断分析标本是否携带目标基因,同时可以确认胚胎性别。这一方法是有创方法,操作损伤的结果是有些早期胚胎停止发育,因而导致临床种植率降低。
针对性连锁遗传的胚胎性别控制,精子类型的选择是更合理的方法。但目前常用的人类精子类型选择都是概率选择,比如上游法、梯度离心法、流式细胞术等等,用于授精的精子标本是包含大量精子的细胞集群,这一细胞集群内X精子和Y精子的比率会有偏移,不是1:1,但肯定有非目标类型的精子掺杂。使用流式细胞术分离人类精子,需加入荧光剂沾染精子,这对胚胎发育的远期影响难以评估,而且,由于人类X和Y类型精子的形态差异不明显,流式细胞术对人类精子类型的选择也不能避免非目标类型的精子掺杂,流式细胞术处理后的人类精子标本中,非目标类型精子数量还是约占比30%。
发明内容
本发明的实施例提供的精子类型的选择方法、基于遗传性状的精子选择方法以及载体可以在授精前精确确认特定单个精子的类型,通过单精子卵胞浆内注射操作完成授精,以精子类型来控制胚胎性别或性状,无需对发育中的胚胎进行遗传检查。
本发明实施例提供了一种精子类型的选择方法,能够精确确认特定单个精子的类型,提高精子类型选择的准确率。该方法包括步骤:
S1、提供一载体,所述载体表面为超疏水亲油表面,所述载体表面上设有一一对应的第一亲水表面收集区域及第二亲水表面收集区域;
S2、将断离尾部的精子放置在所述载体的第一亲水表面收集区域内,并将所述精子的尾部放置在与所述第一亲水表面收集区域对应的第二亲水表面收集区域内;
S3、检验所述第二亲水表面收集区域内的精子尾部,筛选包目标精子表达特异蛋白的精子尾部;
S4、根据包含目标精子表达特异蛋白的尾部找出所对应性状的第一亲水表面收集区域内的精子,完成精子类型的选择。
在另一个优选实施例中,在所述步骤S2后,还包括步骤:
S21、将适量的精子玻璃化冷冻保护剂加入到第一亲水表面收集区域。
作为上述方案的改进,所述载体中设有易于分离的线状连接结构,在所述步骤S2后,还包括步骤:
S22、通过所述线状连接结构将所述载体分离成两部分,使所述第一亲水表面收集区域全部位于一部分,而所述第二亲水表面收集区域全部位于另一部分;
S23、将分离后的第一亲水表面收集区域投入液氮中,以完成精子冷冻。
作为上述方案的改进,在所述步骤S4后,还包括步骤:
S5、解冻所述载体中的第一亲水表面收集区域,复苏冷冻的精子;
S6、将所选择的规定性状的精子进行单精子卵胞浆内注射,完成授精。
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