[发明专利]固体脂质磁共振纳米粒子及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种固体脂质磁共振纳米粒子及其制备方法和应用，该纳米粒子以单硬脂酸甘油酯和卵磷脂为脂质材料，通过十八胺与磁共振对比剂钆喷替酸葡胺复合，海藻糖作为冻干保护剂，制备肠道易吸收的脂质纳米粒。本发明在原有固体脂质纳米粒制备方法的基础上进行优化，纳米对比剂摄取消化道后，延长纳米粒中钆喷替酸葡胺在消化道活体组织不吸收的钆喷替酸葡胺的中的释放时间，延长MR活体成像时间，增加乳腺癌等肿瘤成像时间窗，并降低了材料的细胞毒性。

技术领域

本发明涉及负载磁共振对比剂钆喷酸葡胺的固体脂质纳米粒载体的制备和优化及其体外药物释放行为、细胞药效学研究、体外MRI检测。

背景技术

相较于传统的影像学检查方法如CT、PET、X射线等，MRI具有较高空间分辨率、良好的软组织对比度、无电离辐射，且在一定程度上可以显示生理学和解剖学细节的优越性。但临床实践中发现良、恶性肿瘤组织之间，肿瘤组织与正常组织之间，弛豫时间T1、T2会互相重叠，信号强度相差不大，因此有必要应用MR对比剂，提高组织间的图像对比，继而提高MRI诊断的敏感性与特异性。应用于临床的MRI造影剂需要满足条件有：(1)良好水溶性；(2)选择性滞留在被检测部位；(3)弛豫效能高；(4)毒性低。其在消化道应用有两种方法，第一种是通过对比剂口服(MR小肠成像)和灌肠(MR大肠成像)方法，此方法小病灶检出率低、且易于肠内容物混淆而不易辨别；第二种是通过静脉注射对比剂，通过病变与正常肠壁的强化差异显示病变，此种方法虽检出效果高于前者，但是无靶向特异性。

目前应用较为广泛的造影剂是钆喷酸葡胺(Gd-DTPA)，它本身不能被肠道吸收且不产生信号，需要通过影响体内局部组织的水质子弛豫时间与周围组织形成对比产生造影作用。而大肠与小肠较强的吸收功能可使很多药物通过肠道吸收进入体内，因此设计一个易被肠道吸收的载体包载Gd-DTPA，促进肠壁对Gd-DTPA的吸收并缩短T1弛豫时间、增强MRI信号具有重要的意义。

固体脂质纳米粒(solid lipid nanoparticles,SLN)是由甘油三酯、复合甘油酯等天然或合成的脂质材料制备，粒径在50-1000nm之间。SLN具有较高的口服利用度、可降低药物的肾毒性，此外具有良好稳定性、毒性低、包载药物稳定、低毒、可大规模生产等优点，因此固体脂质纳米粒被认为 是口服药物的理想载体。常见Gd-DTPA载入SLN的方法有溶剂扩散法、乳化法、高压乳匀法等，前期的工作中采用溶剂扩散法包载Gd-DTPA，包封率达到55％，但是在释放实验中发生短时间突释效应，原因在于钆喷酸葡胺是一种亲水性药物，与由脂质材料构成的SLN亲和力弱。

发明内容

本发明提供了一种固体脂质磁共振纳米粒子及其制备方法和应用，该固体脂质磁共振纳米粒子克服了现有的磁共振对比剂中Gd-DTPA释放速度过快的现象。

一种固体脂质磁共振纳米粒子的制备方法，包括以下步骤：

(1)将吐温-80溶于水中得到水相，将司盘-80溶于有机溶剂中得到有机相，然后将水相加入到有机相中，超声处理得到微乳液；

(2)将钆喷酸葡胺溶解于水中得到水溶液，将十八胺溶解于乙醇中得到乙醇溶液，然后将水溶液和乙醇溶液复合后除去溶剂得到中间产物；

(3)将步骤(2)得到的中间产物分散到含有脂质材料的溶液中，然后加热条件下注入到步骤(1)得到的微乳液中，经过搅拌、离心和冷冻干燥得到所述的固体脂质磁共振纳米粒子。

在现有的纳米粒制备过程中，由于脂质材料具有两亲性，当包载水溶性的顺磁性对比剂钆喷酸葡胺时对药物的包封率不高并且会产生药物的突释现象。本发明采用微乳液溶剂扩散法制备固体脂质磁共振纳米粒子，首先通过十八胺与Gd-DTPA复合，加入亚微乳，再进行冷冻干燥，提高了固体脂质磁共振纳米粒子中水溶性药物的包载效率，并且有效地避免了突释现象。

作为优选，步骤(1)中，所述的吐温-80与水的用量比为1.8～2.5g：100mL；