[发明专利]一种深海耐盐、耐碱蛋白酯酶的表达和纯化、晶体结构及其应用

权利要求书

1.一种海洋细菌新型酯酶PE8晶体，为三维结构，其特征在于：所述酯酶PE8包含219个氨基酸，其氨基酸序列如SEQ.ID.NO1所示，分子量为23.19kDa；晶体三维结构中，分辨率为1.66Å，酯酶PE8的晶体结构空间群为P21，一个不对称单位含两个蛋白分子；晶胞参数为：a＝41.772Å，b＝73.398 Å，c＝ 66.403 Å，α＝γ＝90°，β＝102.37°；所述晶体结构的原子坐标如表1所示。

2.根据权利要求1所述的酯酶PE8晶体，其特征在于：由9个β折叠和8个α螺旋组成，其中，所述的9个β折叠位于中心，所述的8个α螺旋围绕在β折叠的周围。

3.根据权利要求2所述的酯酶PE8晶体，其特征在于：β折叠1，即含Pro10-Leu12的氨基酸区段，β折叠2，即含Ser21-Leu26的氨基酸区段，α螺旋1，即含 Asn32-Arg44的氨基酸区段，β折叠3，即含Asn49-Ala54的氨基酸区段，β折叠4，即含Val59- Cys61的氨基酸区段，β折叠5，即含Gly67- Glu69的氨基酸区段，α螺旋2，即含Arg79-Gly106的氨基酸区段，α螺旋3，即含Gly108-Pro109的氨基酸区段，β折叠6，即含Asn111-Phe117 的氨基酸区段，α螺旋4，即含Ser118-Leu129的氨基酸区段，β折叠7，即含Ala137-Ser142的氨基酸区段，α螺旋5，即含Ala147-Lys150的氨基酸区段，α螺旋6，即含Leu151-Ile155的氨基酸区段，β折叠8， 即含Pro160-Asn167的氨基酸区段，α螺旋7，即含Val174-Leu187的氨基酸区段，β折叠9，即含Asn190-Ser196的氨基酸区段，α螺旋8，即含Ala204-Leu219的氨基酸区段。

4.根据权利要求1所述的酯酶PE8晶体，其特征在于：第118位丝氨酸，第169位天冬氨酸与第201位组氨酸构成催化活性中心。