[发明专利]一套节本增效明显的繁育早熟马铃薯试管苗的培养基

说明书

技术领域

本发明专利属于农业组织培养技术的植物再生技术领域，具体涉及到马铃薯试管苗快繁壮苗培养技术。

背景技术

马铃薯是我国菜粮兼用的一种农作物，由于常年种植，病毒在其种薯中连年复制和积累，导致病毒在薯块中代代相传，造成产量持续下降，通过脱毒后的马铃薯产量可以提高30-200%，上世纪70年代，我国科技人员开始研究马铃薯脱毒快繁技术，经过多年的研究，目前脱毒技术已经基本成熟，但试管苗在繁育过程因为品种因素、地域因素、研究条件和应用目的的差异，培养基的配方不尽一致，成本和效果也相差甚远。

早熟马铃薯试管苗在不加入抑制剂的培养基中也能很快生长，但叶片之间节间长，腋芽萌发率高，叶片面积小，茎秆柔嫩纤细，栽植成活率也较低。

据报道，很多研究报道选用6-BA、BA、NAA、IBA、矮壮素、B₉等作为生长调节剂进行马铃薯试管苗的快繁生产，目的是促进快速生根、增加茎叶鲜重、降低节间距离、减少腋芽萌发，但还是很难实现规模化生产，通过运用温控设备后，温度控制在18-25℃，虽然能达到一定的壮苗效果，但由于规模化生产后控制温度等需要花费高昂的成本投入，而且在移栽时，由于茎叶纤维化程度不高，叶片面积小，栽植后成活率相对较低且缓苗期长，有的研究人员通过延长试管苗的培养时间、改善其光照质量、增加炼苗时间和环节等来增大叶片面积、提高茎秆纤维化程度，有的则是通过加大抑制剂浓度或者通过固液培养基轮换培养来控制试管苗的健壮程度，由于液体培养基接种操作不方便，窒息率也较高，而且都在扩繁方面投入大量人力和物力成本，成本耗费很大；也曾有报道用AgNO₃促进试管苗壮苗达到增加试管薯产量的目的，但由于应用目的单一，应用领域受到很大程度的限制。

发明内容

本发明根据马铃薯试管苗的不同用途、不同阶段来配制培养基，不需要严格精准的温控和光照条件；继代扩繁阶段在培养基中加入3mg/L的B₉试剂可缩短试管苗继代周期，提高试管苗扩繁效率；移栽阶段即在移栽前最后一次培养基中加入2-10mg/L的AgNO₃溶液，可使叶片面积提高2-3倍，提高试管苗茎秆的纤维素含量、健壮程度和试管苗的整齐度，不需要投入过高的控温、光照成本，可以明显提高试管苗的生产效率和质量，再通过培养基配制方法的改进，可以减少炼苗时间和环节，缩短移栽缓苗期，提高移栽的成活率，生产成本与当前技术比可降低30%以上，是一套高效率低成本的马铃薯试管苗培养基。

快繁时在培养基中加入浓度为3ppm的B₉试剂，由于其叶片大小、节间间距适宜，使茎段生根发育迅速，切断操作时便利高效，明显提高了继代系数和扩繁效率；在即将移栽的最后一次培养基中加入浓度2-10ppm的AgNO₃，可起到增加叶片面积2-3倍，显著提高试管苗健壮程度，炼苗只需3-7天，可使移栽苗成活率达到98%以上，不仅如此，可明显缩短缓苗期，移栽后5-7天就有明显的新根发出，15天就可结出小薯，应用这套培养基能显著提高试管苗的扩繁速度和快繁质量，成本较低且操作方便易行，是试管苗快繁和壮苗的高效结合。

本发明通过运用2种不同种类的添加物质，结合其性状表现，既提高了快繁的速度，又提高了苗体的健壮程度，既节约了成本，又克服了单一抑制剂由于反复继代扩繁在苗体累积而产生耐药性现象。

本发明将大量元素母液中的KH₂PO₄、CaCl₂·2H₂O分别单独配制，打破了目前马铃薯组织培养过程中五种大量试剂同时加入的传统，可以明显减少大量元素由于离子间静电作用和化学反应所产生的磷酸盐沉淀，提高元素的利用率。

具体实施方式

实施例一：

基本母液及培养基的配制：

9.1、母液1：1L母液1含有以下物质：1850～1950mgKNO₃、1650～1700mgNH₄NO₃、369～371mg的MgSO₄·7H₂O、439～441mgCaCl₂·2H₂O，以上各类物质用蒸馏水溶解，定容贴好标签4℃保存备用；

9.2、母液2：1L母液2含有以下物质：169～171mgKH₂PO₄