[发明专利]一种酶法制备穿心莲内酯糖苷衍生物的方法

权利要求书

1.一种酶法制备穿心莲内酯糖苷衍生物的方法，以2-甲基四氢呋喃-水为反应介质，以葡萄糖为糖基供体，在反应温度30～45℃下，利用β-葡萄糖糖苷酶催化穿心莲内酯进行糖基化反应，合成得到19-O-葡萄糖基-穿心莲内酯。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于所述反应介质中2-甲基四氢呋喃与水的比例为80∶20～95∶5。

3.根据权利要求2所述方法，其特征在于所述反应介质中2-甲基四氢呋喃与水的比例为90∶10。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：

把穿心莲内酯、葡萄糖和反应介质按质量/质量/体积比例1∶3∶25混合，按β-葡萄糖苷酶与穿心莲内酯的用量之比为250～1000U/g的比例加入糖苷酶，而后加热至30～45℃、振荡速度为100rpm的条件下反应24～72h，而后分离纯化得到穿心莲内酯糖苷衍生物。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于β-葡萄糖苷酶与穿心莲内酯的用量之比为750U/g。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于所述β-葡萄糖苷酶来源于杏仁，用海藻胶进行固定化，酶活为250U/g。

7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于所述的分离纯化方法如下：反应混合物经6000rpm离心，去除糖苷酶，再减压蒸发去除溶剂，所得到的混合物用甲醇溶解，然后用C18柱纯化，洗脱剂为二氯甲烷∶甲醇∶水＝30∶20∶10，而后浓缩，真空干燥，得到白色粉末即为穿心莲内酯糖苷衍生物。