[发明专利]一株高产中性蛋白酶的解淀粉芽孢杆菌

说明书

本发明涉及功能微生物筛选技术领域，具体是通过紫外诱变的方法获得一株突变菌株解淀粉芽孢杆菌FN61，保藏编号为CCTCC NO：M2015527。所述突变菌能显著提高中性蛋白酶的产量，20L罐发酵酶活高达14135 U/ml，较出发菌提高了42%。该突变菌所产中性蛋白酶的最适作用pH为7.5，与出发菌株一致，但突变菌产的蛋白酶在pH6.5‑8.5范围内的相对酶活普遍高于出发菌，从而说明突变菌产的蛋白酶比出发菌更适合在中性条件下发挥作用；该突变菌产的蛋白酶最适作用温度为40℃，较出发菌没有发生改变，取得了意料不到的技术效果。本发明所述突变菌株FN61产中性蛋白酶可广泛应用于饲料和食品加工领域，前景广阔。

技术领域

本发明属于微生物筛选技术领域，具体涉及一株高产中性蛋白酶的解淀粉芽孢杆菌及其应用。

背景技术

蛋白酶是催化肽键水解的一类酶，可将大分子的蛋白质水解为氨基酸、小肽等产物。中性蛋白酶是指最适作用pH为6.0-7.5的一类蛋白酶，作为一种生物催化剂，它具有催化反应速度快，无工业污染，催化反应条件适应性宽等的性质和优点。微生物由于具有生长速度快、所需生长空间小、广泛的生化多样性及其遗传可操作性等特点，因而备受人们的青睐。据统计，微生物蛋白酶占据了世界整个酶销售市场约40%左右的份额，已成为市场上蛋白酶生产的主要来源。大多数市售中性蛋白酶大都产自芽孢杆菌属。

中性蛋白酶是最早为人类所发现并应用于工业化生产的蛋白酶制剂之一。目前中性蛋白酶已被广泛的应用于食品、皮革、毛皮、化妆品、医药等行业。其中，在畜禽饲料配方中添加中性蛋白酶，可有效提高蛋白质的利用率和降低饲养成本；另外，中性蛋白酶具有较强的脱毛能力，能够避免传统的皮革加工使用硫酸钠进行处理造成的环境污染；中性蛋白酶应用于啤酒生产中，可排除蛋白质产生的“冷浑浊”现象；在洗涤剂用品中加入中性蛋白酶可大大提高洗涤效果；在医药行业中，中性蛋白酶还可作为消化、消炎、化痰止咳等药物，以及用于治疗跌打伤、水肿血肿，消除坏死组织等。

中性蛋白酶的研究开发工作自上世纪七十年代就已开始，国内外都于上世纪八十年代初实现产业化，但中性蛋白酶发酵单位一直很低，发酵不稳定，易受噬菌体和酵母的污染。因此国内外科技工作者一直致力于加速开发新型中性蛋白酶高产菌株，提高生产菌株的产酶能力，从而降低中性蛋白酶的生产成本。

发明内容

本发明的目的是提供一株高产中性蛋白酶的解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）及其应用。本发明通过紫外诱变的方法筛选出一株中性蛋白酶高产菌株，该菌株能高效分泌表达中性蛋白酶，为中性蛋白酶的广泛应用奠定了基础。

本发明一方面涉及一种解淀粉芽孢杆菌突变株，为解淀粉芽孢杆菌FN61（Bacillus amyloliquefaciens FN61），已于2015年9月14日保藏于中国武汉 武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M2015527。

本发明另一方面涉及一种中性蛋白酶，是由上述解淀粉芽孢杆菌突变株FN61发酵得到的。

所述中性蛋白酶在饲料和食品加工领域中的应用。

本发明通过紫外诱变的方法获得的突变菌株解淀粉芽孢杆菌FN61能显著提高中性蛋白酶的产量，20L罐发酵酶活高达14135 U/ml，较出发菌提高了42%。该突变菌所产中性蛋白酶的最适作用pH为7.5，与出发菌株一致，但突变菌产的蛋白酶在pH6.5-8.5范围内的相对酶活普遍高于出发菌，从而说明突变菌产的蛋白酶比出发菌更适合在中性条件下发挥作用；该突变菌产的蛋白酶最适作用温度为40℃，较出发菌没有发生改变，取得了意料不到的技术效果。本发明所述突变菌株FN61产中性蛋白酶可广泛应用于饲料和食品加工领域，前景广阔。

附图说明

图1为突变菌FN61和出发菌FN产蛋白酶的作用pH-相对酶活曲线图；