[发明专利]一种在交变电场下合成油酸/油酸钠囊泡的方法

说明书

技术领域

本发明属于细胞生物学，膜生物物理学，生物化学、药物载体和微纳米技术领域，具体涉及一种合成油酸/油酸钠囊泡的方法。

背景技术

囊泡因其特有的仿生膜结构和可以包封蛋白质、DNA、药物等化学物质的特点，在原始细胞膜模型研究和新型药物载体构建方面具有重要的研究意义和应用价值。脂肪酸及其盐类是史前时期存在的最简单的双亲分子，可在特定的pH值下发生分子自组装形成囊泡结构，是一类非常重要的原始细胞模型，当前合成囊泡主要采用价格比较昂贵的磷脂作为原料，这在一定程度上限制了其作为药物载体的发展。油酸是一种天然不饱和脂肪酸，价格低廉，其分子在pH小于8的溶液中以油水相分离的状态存在，而在其pKa值附近(pH8-10)可以形成稳定囊泡，然而当pH大于10时囊泡结构消失转变为胶束结构，这种受pH调控的特性也使得油酸囊泡在药物控释载体方面具有潜在的应用价值。因此，制备得到在光学显微镜下易于观察的巨型囊泡，并发明一种成本低，产率高，普适性好、流程简单的油酸囊泡制备方法，将对扩大油酸囊泡的研究和应用价值具有重要的现实意义。

发明内容

本发明要解决现合成囊泡的方法或存在采用价格比较昂贵的磷脂作为原料，限制了其作为药物载体发展，或存在采用油酸合成的囊泡较小，在光学显微镜下不易于观察的问题，而提供一种在交变电场下合成油酸/油酸钠囊泡的方法。

一种在交变电场下合成油酸/油酸钠囊泡的方法，具体是按照以下步骤进行的：

一、配置油酸/油酸钠的甲醇溶液：将油酸和油酸钠溶于甲醇中，超声5min～20min，得到油酸/油酸钠甲醇溶液；

所述的油酸/油酸钠甲醇溶液中油酸的浓度为0.005mol/L～0.02mol/L；所述的油酸/油酸钠甲醇溶液中油酸钠的浓度为0.005mol/L～0.02mol/L；且所述的油酸/油酸钠甲醇溶液中油酸与油酸钠的物质的量比为1:1；

二、ITO电极的预处理：将两片ITO电极先用蒸馏水超声清洗5min～15min，然后再用无水乙醇超声清洗5min～15min，将两片清洗后的ITO电极用氮气吹干，最后再经等离子清洗机清洗20s～30s，得到两片预处理后的ITO电极；

三、涂覆处理：将两片预处理后的ITO电极表面分别涂覆5μL～15μL的油酸/油酸钠甲醇溶液，并置于温度为20℃～60℃的真空干燥箱中蒸干甲醇，得到两片表面覆有油酸/油酸钠的ITO电极；

四、组装电形成装置：将聚四氟乙烯矩形框置于两片表面覆有油酸/油酸钠的ITO电极中间，得到电形成装置，且聚四氟乙烯矩形框与两片表面覆有油酸/油酸钠的ITO电极形成中间空腔，中间空腔内填充pH缓冲溶液，然后将填充pH缓冲溶液的电形成装置放置于温度25℃～50℃的加热板上；

所述的pH缓冲溶液为pH＝8.5的Tris-HCl缓冲溶液或pH＝8.5的磷酸盐缓冲溶液；

五、电形成油酸囊泡：在温度为25℃～50℃的条件下，在两片表面覆有油酸/油酸钠的ITO电极上分别连接信号发生器，设定交流电压为1V～8V，波形为正弦波，设定频率为50Hz～5000Hz，时间控制为10min～150min，即完成在交变电场下合成油酸/油酸钠囊泡的方法。

本发明的有益效果是：本发明涉及一种在交变电场条件下形成油酸囊泡的方法。使用经济、绿色的油酸作为合成囊泡的原料，在特定pH的缓冲溶液中油酸分子和油酸根离子之间存在强烈的氢键作用，可以形成双分子层结构，再利用电形成法可以制备得到巨型囊泡的特点，实现了在交变电场条件下制备巨型油酸囊泡，且巨型油酸囊泡易于在光学显微镜下观察。该方法与传统的磷脂相比大大提高了经济性，磷脂材料价格约1元/毫克，而油酸约为1元/10克，具有操作简单，反应条件温和，在低压交变电场下即可制得，反应速度快(1h～2h)、生成囊泡尺寸均匀(1μm～40μm)、可控性好，可通过调整电压和频率控制生成囊泡的大小，油酸/油酸钠囊泡可在电极表面稳定吸附存在48h，稳定性好，成本低等优点，既丰富和扩展了油酸囊泡的制备方法，也为细胞生物学、膜生物物理学、生物化学、仿生学领域的相关膜特性研究和应用提供了可靠模板。

本发明用于一种在交变电场下合成油酸/油酸钠囊泡的方法。

附图说明

图1是本发明电形成装置的结构示意图，1为表面覆有油酸/油酸钠的ITO电极，2为聚四氟乙烯矩形框；

图2是实施例一制备的油酸/油酸钠囊泡的光学显微镜照片；

图3是实施例二制备的油酸/油酸钠囊泡的光学显微镜照片。

具体实施方式