[发明专利]一种异叶青兰总多酚的制备方法及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种总多酚的制备方法，尤其涉及一种异叶青兰总多酚的制备方法及其应用。

背景技术

异叶青兰（DracocephalumheterophyllumBenth）系唇形科（Labiatae）青兰属（Dracocephalum）植物，主要分布于亚洲温带。该植物在民间被广泛应用，具有平肝、清热、治疗高血压、淋巴结炎、肺热咳嗽的作用。现代研究表明异叶青兰中的化学成分主要包括苯丙素类、黄酮类和萜类。至今未见有关异叶青兰多酚类化合物的研究报道。

研究表明：自由基的强氧化作用可导致基因突变、细胞损伤、色素形成、组织硬化。人体衰老、心脑血管疾病、糖尿病、肝硬化、炎症、癌症、息肉、肌瘤等80余种疾病都与体内氧化形成自由基密切相关。另外食物的变质、腐烂等也与氧化反应密切相关。因此抗氧化剂成为食品、药品及保健品领域的一个重要的研究内容。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种工艺简单、成本低的异叶青兰总多酚的制备方法。

本发明所要解决的另一个技术问题是提供该异叶青兰总多酚的应用。

为解决上述问题，本发明所述的一种异叶青兰总多酚的制备方法，包括以下步骤：

⑴提取：异叶青兰全草粉末用其质量5~20倍且体积浓度为50~90%的乙醇水溶液在50~70℃温度下回流提取1~3次，每次3~5h，合并得到提取液，该提取液经减压浓缩，即得异叶青兰乙醇提取物；

⑵除色素：所述异叶青兰乙醇提取物用其质量30~50倍的蒸馏水溶解后加入与溶解液等体积的石油醚，在室温下萃取1~3次，每次3~5h，弃去有色素的石油醚部位萃取液，得到水部位萃取液；

⑶粗制：所述水部位萃取液中加入等体积的乙酸乙酯，在室温下萃取1~3次，每次3~5h，合并得到乙酸乙酯部位萃取液，该乙酸乙酯部位萃取液经减压浓缩，即得异叶青兰总多酚粗品；

⑷精制：所述异叶青兰总多酚粗品用其质量5~10倍的蒸馏水溶解成混悬液，并用0.5mol/L的HCl溶液将其调至pH为3~4后，采用湿法上样于处理好的大孔树脂层析柱中，先用2~3倍柱体积的浓度为20%的乙醇水溶液洗脱，以除去多糖及其他杂质；然后用50~70%的乙醇水溶液洗脱，收集50~70%的乙醇水洗脱液；所述50~70%的乙醇水洗脱液经减压浓缩，即得异叶青兰总多酚精制品。

所述步骤⑴中异叶青兰全草粉末是指将采自青海省海北州、果洛州、玉树州、海东地区的异叶青兰经阴干粉碎后，过40~60目筛所得的粉末。

所述步骤⑴、步骤⑶、步骤⑷中减压浓缩的条件均是指温度为50~70℃、压力为0.05~0.07MPa。

所述步骤⑷中大孔树脂层析柱是指NKA-Ⅱ型大孔吸附树脂、D101型大孔吸附树脂、AB-8型大孔吸附树脂、HPD-500型大孔吸附树脂中的一种，该大孔树脂层析柱尺寸为80mm~100mm×100cm~200cm。

所述步骤⑷中上样流速为1~2Bv/h。

所述步骤⑷中洗脱流速为3~5Bv/h。

如上所述的一种异叶青兰总多酚的制备方法制得的异叶青兰总多酚作为抗氧化剂在制备抗氧化药物或保健食品中的应用，其特征在于：该异叶青兰总多酚作为有效组分按常规方法与药学上可接受的任何载体制成各类抗氧化药用制剂，或作为有效组分按常规方法与食品科学上可接受的任何载体制成各类保健类食品。

本发明与现有技术相比具有以下优点：

1、本发明采用乙醇水溶液回流提取，操作简便，提取率高，乙醇可回收重复利用，提取成本低。

2、本发明采用石油醚萃取除色素，溶剂价格低廉，易于获取，且溶剂可以重复利用，易于规模化生产。

3、本发明采用液液分配萃取对异叶青兰总多酚进行富集，富集效率高，杂质少，且成本低廉。

4、本发明采用大孔树脂层析柱对异叶青兰总多酚进行纯化，大孔树脂可再生重复利用，进一步降低了制备成本，且所用大孔树脂对总多酚的纯化效果好，所得总多酚纯度高。

5、本发明具有良好的稳定性和重复性，每批异叶青兰浸膏提取物的得率可达20%~30%，异叶青兰总多酚精制品的总多酚含量可达到60%以上，为异叶青兰总多酚工业化生产以及相关健康产品的开发提供科学依据。

6、本发明所获得的异叶青兰总多酚经测试，具有很好的抗氧化作用。

⑴异叶青兰总多酚清除DPPH自由基的活性：