[发明专利]一种测定CN-的比率型荧光探针及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种测定CN^-的比率型荧光探针，特征在于，它是1-乙基-3,3-二甲基-2-(N-乙基咔唑-3-乙烯基)苯并吲哚碘化物(Probe1)，其结构式为：

2.如权利要求1所述的一种测定CN^-的比率型荧光探针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

将N-乙基咔唑-3-甲醛和1,1,2-三甲基-3-乙基苯并吲哚碘化物按摩尔比1︰1溶于乙醇中，加热回流反应4h，冷却，过滤，用乙醇洗涤得紫褐色固体即可。

3.一种荧光检测CN^-的方法，其特征在于，步骤为：

(1)用DMSO体系配制1mM的Probe1荧光探针储备液；

(2)将2mLDMSO和20μLProbe1荧光探针储备液加入荧光比色皿中，在荧光分光光度仪上检测，随着待测样的加入，440nm处的荧光强度逐渐增强，595nm处的荧光强度逐渐减弱；

(3)用蒸馏水配制1×10^-4M的CN^-溶液，将2mLDMSO和20μLProbe1荧光探针储备液加入荧光比色皿中，每次加入5μLCN^-进行荧光滴定实验，共加40μL；以CN^-浓度为横坐标，以相对荧光强度I_440nm/I_595nm为纵坐标绘制图，得到CN^-浓度的工作曲线，线性回归方程为：I_440nm/I_595nm＝28.8c–16.9，c的单位为10^-6M；通过线性拟合得到Probe1最佳线性响应CN^-的范围为：1μM–2μM,线性相关系数为R²＝0.9902。

4.如权利要求1所述的一种咔唑类测定CN^-的比率型荧光探针可应用于细胞内CN^-的检测。