[发明专利]甘氨酸在减弱荧光素FITC标记D‑二聚体抗体时猝灭现象中的应用有效
申请号: | 201510589059.3 | 申请日: | 2015-09-16 |
公开(公告)号: | CN105203772B | 公开(公告)日: | 2017-05-24 |
发明(设计)人: | 陆晨;张闻;王建飞;周海滨 | 申请(专利权)人: | 宁波瑞源生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/58;G01N33/542 |
代理公司: | 宁波市鄞州盛飞专利代理事务所(普通合伙)33243 | 代理人: | 张向飞 |
地址: | 315000 浙江省宁*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 甘氨酸 减弱 荧光 fitc 标记 二聚体 抗体 时猝灭 现象 中的 应用 | ||
1.甘氨酸在减弱荧光素FITC标记D-二聚体抗体时淬灭现象中的应用,其特征在于,甘氨酸通过共价键或离子键结合抗体标记时残留的多余荧光素FITC,减少超滤次数,减弱淬灭现象,提高荧光素-抗体纯度和荧光检测信号;
所述的应用步骤如下:
先将荧光素用DMF溶解至0.5-2mg/mL得荧光素FITC;
将D-二聚体抗体和荧光素FITC分别用PBS溶液稀释;
将稀释后的荧光素FITC和D-二聚体抗体混匀,添加甘氨酸至最终甘氨酸的浓度为1-5mmol/L,然后在30-40℃下混匀1-2小时;
经过超滤、离心,最后用D-二聚体抗体稀释液定容;所述D-二聚体抗体稀释液的组分为:1-2%酪蛋白,0.1-0.3%叠氮化钠,1-3%表面活性剂,10-20mM PBS。
2.根据权利要求1所述的甘氨酸在减弱荧光素FITC标记D-二聚体抗体时淬灭现象中的应用,其特征在于,D-二聚体抗体和保存处理后的荧光素FITC分别都用PBS溶液稀释至原浓度的8-10%。
3.根据权利要求1所述的甘氨酸在减弱荧光素FITC标记D-二聚体抗体时淬灭现象中的应用,其特征在于,所述荧光素FITC和D-二聚体抗体混匀时的比例为1:10-20。
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