[发明专利]一种酵母生产(S)-4-氯苯丙酸甲酯的方法

权利要求书

1.一种解脂假丝酵母细胞生物催化制备(S)-3-羟基-3-（3-氯苯基）丙酸甲酯的方法，其特征在于反应罐中加入磷酸盐缓冲液，pH为6.6，加入底物3-（3-氯苯基）-3-氧代丙酸甲酯，使底物3-（3-氯苯基）-3-氧代丙酸甲酯添加量为80-90g/L，蔗糖酯19-20g/L，葡萄糖20-23g/L、蔗糖33-36g/L、异丙醇5-6%V/V，121℃高压灭菌30分钟；冷却至30.7-31.6℃时，加入湿解脂假丝酵母细胞使其浓度为69-73g/L，通气比为0.085-0.089V/（V分钟），进行生物催化反应，反应时间为66-69小时；反应结束后，滤出细胞，用乙酸乙酯萃取反应液，蒸出乙酸乙酯，得到产物(S)-3-羟基-3-（3-氯苯基）丙酸甲酯，反应转化率98-99％，产品收率96-97％，对映体过量率98.5-99％。

2.权利要求1所述的方法，其特征在于湿解脂假丝酵母细胞制备过程如下：解脂假丝酵母ATCC20462，经斜面、摇瓶、种子罐培养得到种子液；发酵罐加入培养液，121℃高压灭菌30分钟，冷却至28-29℃，将解脂假丝酵母种子液接种至发酵罐，接种比例为7-8％，通气比为0.5-0.6V/（V分钟），28-29℃培养45-48小时，用过滤式离心机离心得到湿解脂假丝酵母细胞，用作生物催化反应催化剂；发酵罐中培养液成份为：葡萄糖20-25g/L，酵母浸膏10-15g/L，玉米油5-7g/L，黄豆粉16-20g/L,KH₂PO₄4.4-5.5g/L，MgSO₄7H₂O0.5-0.6g/L，pH6.6。