[发明专利]一种同时高效提取RNA和DNA的方法及试剂在审

专利信息
申请号: 201510589632.0 申请日: 2015-09-16
公开(公告)号: CN105087549A 公开(公告)日: 2015-11-25
发明(设计)人: 李纯锦;周虚;陈璐;陈树雄;蒋彦文;高珊;赵云;刘卓;李洪蛟 申请(专利权)人: 吉林大学
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 代理人: 赵青朵
地址: 130012 吉*** 国省代码: 吉林;22
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要:
搜索关键词: 一种 同时 高效 提取 rna dna 方法 试剂
【权利要求书】:

1.一种RNA提取试剂,其特征在于,包括如下组分:

BufferA:盐酸胍,吗啉乙磺酸,EDTA,DEPC水;

BufferB:醋酸钠,DEPC水;

BufferC:乙醇,DEPC水。

2.根据权利要求1所述的RNA提取试剂,其特征在于,包括如下组分:

BufferA:1~10mol/L盐酸胍,10~50mmol/L吗啉乙磺酸,10~50mmol/LEDTA,余量为DEPC水;

BufferB:1~10mol/L醋酸钠,余量为DEPC水;

BufferC:50%~90%乙醇,余量为DEPC水。

3.根据权利要求1所述的RNA提取试剂,其特征在于,所述BufferB的pH值为5.0~6.0。

4.一种提取RNA的方法,其特征在于,包括如下步骤:

步骤1:采用BufferA裂解细胞,得到细胞裂解混合物;

步骤2:将所述细胞裂解混合物与乙醇水溶液混合,加入硅胶膜离心柱中,离心,弃掉液体,加入BufferB进行洗涤,再次离心;

步骤3:向硅胶膜离心柱中加入BufferC进行洗涤,离心,弃掉液体,再次离心,洗脱得到RNA;

所述BufferA包括:盐酸胍,吗啉乙磺酸,EDTA,DEPC水;

所述BufferB包括:醋酸钠,DEPC水;

所述BufferC包括:乙醇,DEPC水。

5.根据权利要求4中所述的方法,其特征在于,所述BufferA、所述BufferB与所述BufferC的体积比为(250~450):(400~600):(300~500)。

6.根据权利要求4中所述的方法,其特征在于,所述细胞裂解混合物与所述乙醇水溶液的体积比为(1~2):(1~2),所述乙醇水溶液的体积百分含量为90%~99%。

7.根据权利要求4中所述的方法,其特征在于,所述离心的转速为8000~15000g。

8.一种RNA和DNA提取试剂,其特征在于,包括如下组分:

BufferA:盐酸胍,吗啉乙磺酸,EDTA,DEPC水;

BufferB:醋酸钠,DEPC水;

BufferC:乙醇,DEPC水;

BufferD:NaOH溶液。

9.一种提取RNA和DNA的方法,其特征在于,包括如下步骤:

步骤1:采用BufferA裂解细胞,得到细胞裂解混合物;

步骤2:将所述细胞裂解混合物与乙醇水溶液混合,加入硅胶膜离心柱中,离心,弃掉液体,加入BufferB进行洗涤,再次离心,收集液体得到混合液体;

步骤3:向硅胶膜离心柱中加入BufferC进行洗涤,离心,弃掉液体,再次离心,采用DEPC水洗脱,得到RNA;

步骤4:将步骤2得到的混合液体与BufferD混合,加入到步骤3洗脱掉RNA的硅胶膜离心柱中,离心,弃掉液体,采用BufferC洗涤,再次离心,采用DEPC水洗脱,得到DNA;

所述BufferA包括:盐酸胍,吗啉乙磺酸,EDTA,DEPC水;

所述BufferB包括:醋酸钠,DEPC水;

所述BufferC包括:乙醇,DEPC水;

所述BufferD包括:NaOH溶液。

10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,所述混合液体与所述BufferD的体积比为(3~5):1。

下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于吉林大学,未经吉林大学许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201510589632.0/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。

×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top