[发明专利]与辣椒CMV抗性基因紧密连锁的分子标记genSSR3000及获取、应用

权利要求书

1.与辣椒CMV抗性基因紧密连锁的分子标记，其特征在于：用于扩增所述分子标记的引物的核苷酸碱基序列如序列表中的SEQ ID NO:1～2。

2.与辣椒CMV抗性基因紧密连锁的分子标记的应用，其特征在于：所述分子标记应用辣椒材料中cr基因的检测；用于扩增所述分子标记的引物的核苷酸碱基序列如序列表中的SEQ ID NO:1～2。

3.根据权利要求2所述与辣椒CMV抗性基因紧密连锁的分子标记的应用，其特征在于：

所述检测包括以下步骤：

辣椒材料基因组DNA提取步骤：对辣椒材料进行提取处理，得到辣椒材料基因组DNA；

PCR扩增反应步骤：以所述序列表中的SEQ ID NO:1～2作为PCR引物，以所述辣椒材料基因组DNA作为模板，进行PCR扩增反应，得到扩增产物；

分析步骤：将所述扩增产物进行电泳分离处理，显色处理，再统计分析所述辣椒材料是否含有cr基因。

4.根据权利要求3所述与辣椒CMV抗性基因紧密连锁的分子标记的应用，其特征在于：

所述PCR扩增反应步骤中，PCR标记反应体系中含有：

模板DNA 0.5-2.0ng/μL，正向、反向引物各1-10ng/μL，dNTP各100-500μmol/L，MgCl₂ 1-5mmol/L，Taq DNA聚合酶0.1-0.5U/μL，体积百分比为10-20％的10×Taq Buffer。

5.根据权利要求4所述与辣椒CMV抗性基因紧密连锁的分子标记的应用，其特征在于：

所述PCR标记反应体系中含有：

模板DNA 1.6ng/μL，正向、反向引物各5ng/μL，dNTP各100μmol/L，MgCl₂ 1mmol/L，Taq DNA聚合酶0.1U/μL，体积百分比为10％的10×Taq Buffer。

6.根据权利要求3所述与辣椒CMV抗性基因紧密连锁的分子标记的应用，其特征在于：

所述PCR扩增反应步骤中，PCR标记反应体系中含有：

体积百分含量为10-50％的模板DNA，所述模板DNA的浓度为2.5ng/μL，正向、反向引物的体积百分含量各5-15％，所述正、反向引物的浓度为50ng/μL，体积百分含量为40-60％的GoMaster mix。

7.根据权利要求6所述与辣椒CMV抗性基因紧密连锁的分子标记的应用，其特征在于：

PCR标记反应体系中含有：

体积百分含量为30％的模板DNA，正向、反向引物的体积百分含量各10％，所述正、反向引物的浓度为50ng/μL，体积百分含量为50％的GoMaster mix。

8.根据权利要求3至7中任一项所述与辣椒CMV抗性基因紧密连锁的分子标记的应用，其特征在于：

所述PCR扩增反应步骤中，PCR反应程序为：94℃预变性4min；94℃变性15s，55℃退火15s，72℃延伸30s，34个循环；72℃保温5min。