[发明专利]一种培养基质及其应用与培养牙髓干细胞的方法有效
申请号: | 201510593746.2 | 申请日: | 2015-09-17 |
公开(公告)号: | CN105368772B | 公开(公告)日: | 2018-12-04 |
发明(设计)人: | 陈海佳;王一飞;葛啸虎;冯德龙;马岩岩 | 申请(专利权)人: | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 |
主分类号: | C12N5/074 | 分类号: | C12N5/074;C12N5/0775 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 赵青朵 |
地址: | 510000 广东省广州市国*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 培养 基质 及其 应用 牙髓 干细胞 方法 | ||
1.一种三维培养基质,其特征在于,由I型胶原水凝胶和培养液组成;
所述培养液由DMEM/F12无血清培养液、血清替代物、bFGF和BMP-2组成;
所述培养液中bFGF和BMP-2的质量比为(8~12):(8~12);
所述I型胶原水凝胶中I型胶原的浓度为5mg/mL~15mg/mL。
2.权利要求1所述的三维培养基在牙髓干细胞传代培养中的应用。
3.一种牙髓干细胞的培养方法,其特征在于,将原代培养的牙髓干细胞以权利要求1所述的三维培养基质传代培养。
4.根据权利要求3所述的培养方法,其特征在于,所述传代培养具体为将牙髓干细胞接种于I型胶原水凝胶后,置于培养液中培养;
所述培养液由DMEM/F12无血清培养液、血清替代物、bFGF和BMP-2组成;
所述培养液中bFGF和BMP-2的质量比为(8~12):(8~12);
所述I型胶原水凝胶中I型胶原的浓度为5mg/mL~15mg/mL。
5.根据权利要求4所述的培养方法,其特征在于,所述接种的密度为1×108个/mL。
6.根据权利要求3所述的培养方法,其特征在于,所述原代培养具体为:将牙髓组织经I型胶原酶消化后以原代培养液培养至细胞80%~90%汇合;所述原代培养液由DMEM/F12无血清培养液、血清替代物、bFGF和EGF组成。
7.根据权利要3所述的培养方法,其特征在于,所述原代培养液中bFGF和EGF的质量比为(8~12):(8~12)。
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