[发明专利]与庚型肝炎病毒E2蛋白相互作用的人类蛋白LT-α

说明书

本发明公开了一种与庚型肝炎病毒相互作用的人类蛋白LT‑α，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，编码人类蛋白LT‑α的基因的核苷酸序列SEQ ID NO：2所示；其是利用第四代酵母双杂交的方法通过庚型肝炎病毒E2蛋白对人类T淋巴细胞cDNA文库进行筛选，获得与庚型肝炎病毒E2蛋白相互作用的人类蛋白，并通过免疫共沉淀的方法对互作蛋白进行阳性验证；本发明可为研究庚型肝炎病毒与HIV‑1病毒之间的作用机制提供一定的理论基础。

技术领域

本发明涉及庚型肝炎病毒对HIV-1抑制作用中相互作用蛋白的研究方法和基因工程领域，具体地说，涉及一种与庚型肝炎病毒E2蛋白相互作用的人类蛋白LT-α。

背景技术

鉴于庚型肝炎病毒(GB Virus C, GBV-C)本身无致病性，但与HIV-1共感染有益于延缓HIV-1 患者病程的特点，阐明GBV-C抑制HIV-1的作用机理将是GBV-C 应用于HIV-1疾病治疗中亟待解决的关键科学问题。综合国内外研究进展，GBV-C 对HIV-1的抑制作用主要包括以下几方面：（1）GBV-C 的包膜糖蛋白E2 通过与HIV-1 Gp41 的结合阻碍HIV 的入胞。（2）GBV-C NS5A 区的短肽可能通过抑制T 细胞中HIV-1辅助受体CCR5 和CXCR4 的表达，阻碍HIV-1入胞。（3）GBV-C 通过降低T 细胞中FAs 蛋白的表达，影响了FAs 诱导的细胞凋亡途径，提高了CD4⁺ T 淋巴细胞数，延缓了HIV-1患者的病程。（4）GBV-C 通过增强T 细胞中Th1 型细胞因子IL-2 和IL-12 的表达，进而抑制了Th2 型细胞因子IL-4、IL-13 和IL-10的表达，最终阻碍了HIV--1复制。（5）GBV-C 通过降低T 细胞信号传导途径中LCK 蛋白的表达，降低T 细胞的活性，导致CD38、CD69、CD25 和CCR5分子的表达明显下降，影响HIV-1的复制。（6）目前，研究发现GBV-C E2 蛋白还可通过阻碍HIV-1 GAG 蛋白组装和释放来抑制HIV-1的复制。以上研究为阐明GBV-C 与HIV-1 的相互作用机理奠定了基础。然而，目前这些研究都具有一定的片面性。因此，GBV-C 抑制HIV-1 的作用机理仍无明确的定论。

确定病毒与共用宿主间直接作用的蛋白及其功能是研究两病毒间相互作用机理的关键环节。目前GBV-C 抑制HIV-1 增殖的作用机理研究主要集中在GBV-C 阻碍了HIV-1入胞过程和改变了T 细胞活性两大方面，尽管已有文献报道GBV-C 的包膜糖蛋白E2 和NS5A短肽可以抑制HIV-1 复制，但究竟GBV-C E2蛋白与其共用宿主上的哪些靶蛋白直接相互作用，从而阻碍了HIV-1 入胞、影响了T 细胞活性等效应的产生，这些靶蛋白的功能又如何，目前仍不明确。因此，展开这些靶蛋白的相关研究对揭示GBV-C与HIV-1互作机制有着十分重要的意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种与庚型肝炎病毒E2蛋白相互作用的人类蛋白LT-α。

为了实现本发明目的，本发明提供一种与庚型肝炎病毒E2蛋白相互作用的人类蛋白LT-α，所述人类蛋白LT-α的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。

所述蛋白LT-α为淋巴毒素α，也被称为肿瘤坏死因子β（TNF-β)，与肿瘤坏死因子A(TNF-α)及淋巴毒素β(LT-β)同属于肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor，TNF)家族。人LT-α基因定位于第6号染色体， LT-α分子由205个氨基酸残基组成，含34个信号肽，成熟型LT-α分子为171个氨基酸残基，相对分子质量为25000。LT-α属于肿瘤坏死因子家族，是细胞活素类物质，可以调节炎症免疫反应，从而影响细胞凋亡分化。LT-α在HIV-1感染的CD4⁺细胞中能够活化或诱导NF-κB，NF-κB结合于HIV-1的长末端重复序列（LTR）的增强子部位，进而活化HIV-1基因，可能与HIV-1的发病有关。

本发明另一目的是提供编码上述人类蛋白LT-α的基因，其核酸序列如SEQ ID NO：2所示。