[发明专利]一种丹皮酚的快速检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种基于快速热解-气相色谱-质谱联用技术(PY-GC/MS法)快速检测丹皮酚含量的方法。

背景技术

丹皮酚(Paeonol)又称牡丹酚，是毛茛科植物牡丹根皮和萝蘼科植物徐长卿干燥根或全草的主要有效成分。具有镇静、催眠、解热、镇痛、抗炎、抗菌等药理作用。

最近的研究表明丹皮酚在心脑血管疾病方面有较好的预防和治疗作用。李薇等将丹皮酚与阿司匹林对改变大鼠血液流变性的作用进行了比较，表明：丹皮酚能降低全血表观黏度、红细胞压积、红细胞聚集性和血小板黏附性，使红细胞的变形能力显著增强；而阿司匹林改变血液流变性的能力则较为局限。由此说明丹皮酚在血栓形成的各个环节都有干预作用。此外，丹皮酚可以剂量依赖的抑制强致癌物的形成，尤其在芳胺类化合物致癌的过程中，起到了抑制肿瘤生长的作用，丹皮酚及其衍生物有望开发成为新一代的抗肿瘤药物。因此，快速、高效检测中药或其复方制剂中的丹皮酚对成药性及中药现代化应用是非常重要的。

现有对丹皮酚的分析检测主要采用高效液相的方法。受分析仪器的限制，往往需要对样品进行较为复杂的前处理，通过萃取等方法将丹皮酚从药材或其复方制剂中分离，随后采用HPLC/UPLC/SFCLC等液相色谱方法分析。该分析方法的样品处理过程复杂、总体分析时间长。

快速热解-气相色谱/质谱联用技术(PY-GC/MS)是一种高效的检测易挥发性成分的技术，近年来发展迅速。低温下的热解过程是一种非常有效的热分离手段，通过控制热解的温度和时间可以实现低沸点的复杂混合物的初步的气-液或气-固相分离；为气相色谱提供一种在线的和实时的样品前处理和初步分离能力。分析检测过程中的热解时间、温度、升温速率、载气流速、分流比、离子化温度等对分析结果的影响是很大的。因此，基于PY-GC/MS技术的特点，目前亟需提出一种针对丹皮酚的快速、微量检测方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种丹皮酚的快速检测方法，并基于此，初步判断牡丹皮、徐长卿等中药材及其制剂质量的高低。

为达到上述目的，本发明采用了以下技术方案：

1)准确称取牡丹皮、徐长卿或其复方制剂0.02～5.00mg得样品，将样品加入热解杯中；

2)采用快速热解-气相色谱-质谱联用仪对加入热解杯中的样品进行测定；

3)经过步骤2)后，根据测定的原始色谱数据及质谱数据，定性样品中丹皮酚的色谱峰，并获得样品中丹皮酚的相对含量。

所述样品为块状或粉末状固体。

所述热解的条件为：热解温度为180～300℃，热解时间为0.1～2min。

所述气相色谱的工作条件为：载气为流速0.1～4.0mL/min的氦气，分流比为0～500：1，升温程序为：初始温度为40～70℃，并保持0～3min，然后以≤20℃/min升至300℃。

所述质谱的工作条件为：采用EI源、正离子检测，电子能量为50～85eV，离子源温度为215～245℃，单四级杆温度为145～185℃，扫描方式为全扫描方式，电子倍增器电压为1075～2980V，溶剂延迟为0～6min。

所述相对含量采用面积归一化方法进行计算。

所述丹皮酚的色谱峰的定性采用NIST08软件自动匹配计算。

本发明的有益效果体现在：

1)快速分离。现有方法是将牡丹皮或徐长卿或其制剂通过萃取方法初步分离得到丹皮酚溶液，过滤处理后，利用液相色谱分析，或薄层层析-光谱联用技术(TLC-SP)等检测其有效成分；该方法的一般分析时间为4～24小时。本发明中通过热分离方法直接对牡丹皮或徐长卿或其制剂的低沸点物质进行初步分离，随后采用气相色谱进一步分离丹皮酚，大大节省了分析时间，常规分析时间为0.1～0.3小时，提高了分析效率。

2)灵敏度好，所需样品量少。HPLC检测方法受到仪器的限制，一般需要先分离得到粗品溶液，因此需要的样品量较大，通常是几克到几十克不等；本发明方法的分析所用样品量一般为0.02～1mg，提高了分析灵敏度。

3)本发明优化了热解、色谱、质谱等检测条件，可以快速定性所需的色谱峰，实现了快速和准确检测。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明。

本发明针对丹皮酚熔沸点相对较低且易挥发的特点，采用快速热解-气相色谱/质谱联用技术(PY-GC/MS)，充分将热分离和色谱分离相结合，实现丹皮酚的快速分离，随后采用质谱定性和定量检测，达到快速、微量检测的目的。

实施例