[发明专利]合成海藻糖的专用菌株及其用于合成海藻糖的方法有效

专利信息
申请号: 201510599925.7 申请日: 2015-09-18
公开(公告)号: CN105219663B 公开(公告)日: 2018-10-23
发明(设计)人: 程海荣;李莉娟;安瑾;张乐彬;王犇;李云枫 申请(专利权)人: 上海交通大学;淄博珍瑭生物科技有限公司
主分类号: C12N1/19 分类号: C12N1/19;C12P19/12
代理公司: 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 代理人: 郭国中
地址: 200240 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 合成 海藻 专用 菌株 及其 用于 方法
【权利要求书】:

1.一株解脂亚罗威酵母(Yarrowia lipolytica),其保藏编号为CGMCC NO.11367,该酵母含有麦芽寡糖基海藻糖合成酶(Maltooligosyltrehalose aynthase,MTSase)、麦芽寡糖基海藻糖水解酶(Maltooligosyltrehalose trehalohydrolase,MTHase)以及海藻糖合成酶(Trehalosesynthase,TreS)。

2.一种如权利要求1所述的解脂亚罗威酵母菌株在合成海藻糖中的用途。

3.一种如权利要求1所述的解脂亚罗威酵母菌株用于合成海藻糖的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:

S1、将解脂亚罗威酵母(Yarrowia lipolytica)CGMCC NO.11367菌株培养于含碳源、氮源、无机盐以及水的培养基中,在pH值2.0~8.0,温度25~35℃条件下振荡或者搅拌发酵培养,发酵结束后菌液分离得到含海藻糖的发酵液以及解脂亚罗威酵母CGMCC NO.11367酵母细胞;所述碳源为低聚麦芽糖或麦芽糖或为低聚麦芽糖、麦芽糖中的一种或两种和葡萄糖的混合;

S2、从所述含海藻糖的发酵液中分离纯化得到海藻糖;

和/或,利用所述酵母细胞转化低聚麦芽糖或者麦芽糖合成海藻糖。

4.如权利要求3所述的解脂亚罗威酵母菌株用于合成海藻糖的方法,其特征在于,所述酵母细胞转化低聚麦芽糖或者麦芽糖合成海藻糖包括如下步骤:

S21、在所述酵母细胞中加入质量百分比浓度为20%~45%的低聚麦芽糖或麦芽糖,在温度20~80℃,pH3~8条件下振荡或搅拌进行转化;

S22、对转化液进行菌液分离,得到不含酵母细胞的转化液与解脂亚罗威酵母CGMCCNO.11367酵母细胞,从转化液中分离纯化得到海藻糖;

S23、步骤S22得到的所述解脂亚罗威酵母CGMCC NO.11367酵母细胞重复进行步骤S21、S22。

5.如权利要求3或4所述的解脂亚罗威酵母菌株用于合成海藻糖的方法,其特征在于,步骤S1中,所述菌液分离前还包括在发酵结束后加入糖化酶反应,再加入酿酒酵母发酵分解葡萄糖的步骤;步骤S22中,所述菌液分离前还包括在所述转化液中加入糖化酶反应,再加入酿酒酵母发酵分解葡萄糖的步骤。

6.如权利要求3所述的解脂亚罗威酵母菌株用于合成海藻糖的方法,其特征在于,

步骤S1中,所述培养基中的碳源为低聚麦芽糖、麦芽糖中的一种或两种和葡萄糖的混合,所述碳源用量为70~300克/升,其中葡萄糖用量占碳源总用量的6.5%~28.5%;所述培养基的氮源为蛋白胨、酵母粉、酵母浸膏、玉米浆干粉、玉米浆、磷酸氢二铵、柠檬酸铵中的一种或几种的混合;所述无机盐为硫酸镁、氯化锰、氯化铜中的一种或几种。

7.一种如权利要求1所述的解脂亚罗威酵母菌株用于合成海藻糖的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:

A1、将解脂亚罗威酵母(Yarrowia lipolytica)CGMCC NO.11367菌株培养于含高浓度葡萄糖、氮源、无机盐以及水的发酵培养基中,在pH值2.0~8.0,温度25~35℃条件下振荡或者搅拌培养发酵,发酵结束后菌液分离,上清为含赤藓糖醇的溶液,沉淀为解脂亚罗威酵母CGMCC NO.11367酵母细胞;所述高浓度葡萄糖的含量为200~300克/升;

A2、利用所述酵母细胞转化低聚麦芽糖或者麦芽糖合成海藻糖。

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