[发明专利]合成海藻糖的专用菌株及其用于合成海藻糖的方法有效
申请号: | 201510599925.7 | 申请日: | 2015-09-18 |
公开(公告)号: | CN105219663B | 公开(公告)日: | 2018-10-23 |
发明(设计)人: | 程海荣;李莉娟;安瑾;张乐彬;王犇;李云枫 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学;淄博珍瑭生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/19 | 分类号: | C12N1/19;C12P19/12 |
代理公司: | 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 | 代理人: | 郭国中 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 合成 海藻 专用 菌株 及其 用于 方法 | ||
1.一株解脂亚罗威酵母(Yarrowia lipolytica),其保藏编号为CGMCC NO.11367,该酵母含有麦芽寡糖基海藻糖合成酶(Maltooligosyltrehalose aynthase,MTSase)、麦芽寡糖基海藻糖水解酶(Maltooligosyltrehalose trehalohydrolase,MTHase)以及海藻糖合成酶(Trehalosesynthase,TreS)。
2.一种如权利要求1所述的解脂亚罗威酵母菌株在合成海藻糖中的用途。
3.一种如权利要求1所述的解脂亚罗威酵母菌株用于合成海藻糖的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
S1、将解脂亚罗威酵母(Yarrowia lipolytica)CGMCC NO.11367菌株培养于含碳源、氮源、无机盐以及水的培养基中,在pH值2.0~8.0,温度25~35℃条件下振荡或者搅拌发酵培养,发酵结束后菌液分离得到含海藻糖的发酵液以及解脂亚罗威酵母CGMCC NO.11367酵母细胞;所述碳源为低聚麦芽糖或麦芽糖或为低聚麦芽糖、麦芽糖中的一种或两种和葡萄糖的混合;
S2、从所述含海藻糖的发酵液中分离纯化得到海藻糖;
和/或,利用所述酵母细胞转化低聚麦芽糖或者麦芽糖合成海藻糖。
4.如权利要求3所述的解脂亚罗威酵母菌株用于合成海藻糖的方法,其特征在于,所述酵母细胞转化低聚麦芽糖或者麦芽糖合成海藻糖包括如下步骤:
S21、在所述酵母细胞中加入质量百分比浓度为20%~45%的低聚麦芽糖或麦芽糖,在温度20~80℃,pH3~8条件下振荡或搅拌进行转化;
S22、对转化液进行菌液分离,得到不含酵母细胞的转化液与解脂亚罗威酵母CGMCCNO.11367酵母细胞,从转化液中分离纯化得到海藻糖;
S23、步骤S22得到的所述解脂亚罗威酵母CGMCC NO.11367酵母细胞重复进行步骤S21、S22。
5.如权利要求3或4所述的解脂亚罗威酵母菌株用于合成海藻糖的方法,其特征在于,步骤S1中,所述菌液分离前还包括在发酵结束后加入糖化酶反应,再加入酿酒酵母发酵分解葡萄糖的步骤;步骤S22中,所述菌液分离前还包括在所述转化液中加入糖化酶反应,再加入酿酒酵母发酵分解葡萄糖的步骤。
6.如权利要求3所述的解脂亚罗威酵母菌株用于合成海藻糖的方法,其特征在于,
步骤S1中,所述培养基中的碳源为低聚麦芽糖、麦芽糖中的一种或两种和葡萄糖的混合,所述碳源用量为70~300克/升,其中葡萄糖用量占碳源总用量的6.5%~28.5%;所述培养基的氮源为蛋白胨、酵母粉、酵母浸膏、玉米浆干粉、玉米浆、磷酸氢二铵、柠檬酸铵中的一种或几种的混合;所述无机盐为硫酸镁、氯化锰、氯化铜中的一种或几种。
7.一种如权利要求1所述的解脂亚罗威酵母菌株用于合成海藻糖的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
A1、将解脂亚罗威酵母(Yarrowia lipolytica)CGMCC NO.11367菌株培养于含高浓度葡萄糖、氮源、无机盐以及水的发酵培养基中,在pH值2.0~8.0,温度25~35℃条件下振荡或者搅拌培养发酵,发酵结束后菌液分离,上清为含赤藓糖醇的溶液,沉淀为解脂亚罗威酵母CGMCC NO.11367酵母细胞;所述高浓度葡萄糖的含量为200~300克/升;
A2、利用所述酵母细胞转化低聚麦芽糖或者麦芽糖合成海藻糖。
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