[发明专利]一种动物用肽疫苗及其制备

说明书

本发明提供了一种口蹄疫合成肽疫苗，具体涉及用于口蹄疫合成肽疫苗的多肽，以及含有该多肽的疫苗及它们的制备方法，所述多肽具有SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列。本发明通过对国内口蹄疫新近流行毒株的序列测定并结合口蹄疫疫苗毒株序列，研究其主要抗原位点的变异情况，同时结合计算机辅助进行抗原位点分析预测，对可能的抗原位点肽段进行化学合成。通过大量动物试验对这些候选多肽抗原进行筛选，根据筛选结果对口蹄疫病毒抗原位点进行了优化，并有效组合了T细胞表位和B细胞表位，增强了多肽抗原的免疫效果。该口蹄疫合成肽疫苗可以有效应对口蹄疫病毒的抗原变异，生物安全性好，易于大规模合成，具有良好的应用前景。

技术领域

本发明涉及一组用于口蹄疫合成肽疫苗的多肽，以及含有这些多肽的疫苗及它们的制备方法，具体涉及一种用于口蹄疫合成肽疫苗的多肽，以及含有该多肽的疫苗及它们的制备方法。

背景技术

口蹄疫(foot and mouth disease，简称FMD)是一种发生于偶蹄动物的急性、高度接触性、发热性传染病，在世界范围内广泛分布。由于其传染性高，传播迅速，感染猪、牛、羊等牲畜导致幼畜死亡，成年动物生产能力急剧下降，严重危害畜牧业的发展和肉食及其畜产品的生产和供应。同时会使动物及动物产品的市场流通和国际贸易受到极大的封锁和限制，给流行国家和地区畜牧业生产造成巨大的经济损失。口蹄疫是由口蹄疫病毒(FMDV)感染引起的，口蹄疫病毒属细小核糖核酸病毒，具有多型性、易变性等特点。目前，已知全世界有7种血清型的口蹄疫病毒：A、O、C、Sat1(南非I型)、Sat2(南非II型)、Sat3(南非III型)和Asia I(亚洲I型)。而每种主型又分若干亚型，目前发现的亚型已有70多种。血清型A、O、C和Asia I型最为常见，其中血清型A病毒的变种最多，具有超过30种亚型。研究结果表明：口蹄疫病毒的衣壳蛋白是由四种结构蛋白VP1、VP2、VP3和VP4(Logan D等，1993)组成的，每种各60个。VP1-VP3组成衣壳蛋白亚单位，位于衣壳蛋白的外侧，而VP4位于病毒颗粒的内部。VP1是主要的保护性抗原，现已发现O型口蹄疫有3个主要的抗原位点位于VP1上，其中133-160和200-213位构成了VP1上最重要且最容易变异的保护性抗原位点。

当前在我国主要流行的口蹄疫是O型和Asia I型口蹄疫。口蹄疫病毒各型之间的抗原性不同，彼此之间不能交互免疫。而且，在同一种血清型中抗原差异的程度也很大，以至于能够有效地抵抗一种亚型的口蹄疫疫苗可能针对同一血清型中的另一种亚型没有保护性。此外，口蹄疫毒株的抗原性还在不断发生变化，随着时间的推移，原有疫苗的效力减弱甚至消失，因此给口蹄疫的防治工作带来了很大的困难。

目前，我国对口蹄疫实行强制性免疫，疫苗免疫是防治口蹄疫的主要手段。而我国现行使用的口蹄疫疫苗主要是病毒灭活疫苗，其存在着生物安全性差、副反应大、产品质量不稳定等问题。目前世界上很多国家已经停止使用灭活疫苗，也禁止从使用灭活疫苗的国家进口畜产品。在口蹄疫新型疫苗的研究方面，先后有基因工程亚单位疫苗、口蹄疫病毒载体疫苗、口蹄疫基因工程修饰疫苗的研究报道，但是其在免疫效果、生物安全性方面都存在着诸多问题，影响了这些新型疫苗的使用。此外，这些疫苗对于当前已经发生变异的流行毒株往往效果较差，不能有效地保护动物。

发明内容

因此，本发明的目的在于提供一种用于口蹄疫合成肽疫苗的多肽，以及含有该多肽的疫苗，特别是用于口蹄疫合成肽疫苗的多肽，以及含有该多肽的疫苗。

本发明的另一个目的是提供一种上述多肽以及上述疫苗的制备方法。

为实现上述目的，本发明采用了以下技术方案：

一种用于口蹄疫合成肽疫苗的多肽，其中所述多肽具有SEQ ID NO.1、SEQ IDNO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列。