[发明专利]人类胚胎脊髓性肌萎缩症突变基因检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及基因诊断领域，具体而言，涉及人类胚胎脊髓性肌萎缩症突变基因检测引物及相应的试剂盒。

背景技术

脊髓性肌萎缩症(spinal muscular atrophy，SMA)是一种以脊髓前角细胞变性为主要病理改变，以进行性、对称性肌无力、肌萎缩为特征的常染色体隐性遗传性神经肌肉病，是临床第二大致死性常染色体隐性遗传性疾病。在活产婴儿中，其发病率约为1/10000至1/6000，人群基因携带率约1/40(Kolb SJ,Kissel JT.Spinal muscular atrophy.Arch Neurol,2011,68(8):979-984)。目前SMA尚无有效的治疗方法。对病情进展缓慢者，理疗、支架以及特殊矫正器材是防止脊柱侧凸及关节痉挛的主要方法，但是这些治疗并不能治愈疾病。因此，对于SMA这种严重致残、致死而又无法根治的疾病，开展产前检测显得尤为重要。

位于人类5号染色体上的运动神经元存活基因1(survival motor neuron 1，SMN1)缺陷是导致SMA的原因。1995年该基因被克隆。正常人的两条5号染色体上至少存在1个SMN1基因拷贝，而SMA患者SMN1基因缺失(特指7号外显子纯合缺失)或者带有1个突变的SMN1基因。研究表明，约95％的SMA患者为SMN1基因纯合缺失所致(缺失型)，另5％的患者为SMN1基因突变所致(突变型)(Lunn MR,Wang CH.Spinal muscular atrophy.Lancet,2008,371(9630):2120-2133)。

SMA的遗传方式为常染色体隐性遗传，即两条染色体上的SMN1基因均存在缺陷时才会导致SMA。一条染色体上的SMN1基因正常，而另一条染色体上的SMN1基因存在缺陷不会致病，此时称之为SMA携带者。若男女双方均为SMA携带者，生育SMA患儿的风险为25％(图1)。

虽然SMA的发病率较低，但是人群携带率却非常高。文献报道各个国家SMA携带者频率为1/40至1/60(Smith M,Calabro V,Chong B,et al.Population screening and cascade testing for carriers of SMA[J].Eur J Hum Genet,2007,15(7):759-766.)。台湾地区SMA携带率为1/48(Su YN,Hung CC,Lin SY,et al.Carrier screening for spinal muscular atrophy(SMA)in 107,611pregnant women during the period 2005-2009:A prospective population-based cohort study.PLoS one,2011,6(2):e17067)。我国南方地区应用DHPLC技术，筛查1712例新生儿，表明中国大陆地区SMA人群携带率为1/42(Zhu SY,Fu X,Chen YJ,et al.Molecular characterization of SMN copy number derived from carrier screening and from ore families with SMA in a Chinese population.Eur J Hum Genet,2010,18(9):978-984.)。

采用试管婴儿技术能有效帮助夫妻均携带SMN1基因的父母解决下一代出现SMA的难题。试管婴儿技术是将卵子与精子取出后置于特定的培养液内培养、受精，受精卵在恒温孵箱中发育为胚胎后移植回母体子宫，最终发育成胎儿。挑选健康胚胎移植是成功预防的关键。胚胎植入前遗传学筛查是指胚胎植入着床之前进行染色体数目和结构异常的检测，挑选无SMA的胚胎植入子宫，以期获得正常的后代。