[发明专利]一种防治鸭细小病毒的卵黄抗体及其制备方法

说明书

本发明涉及生物制品技术领域，具体涉及一种防治鸭细小病毒的卵黄抗体及其制备方法，所述的卵黄抗体来源于使用鸭细小病毒活疫苗和鸭细小病毒灭活疫苗高强度联合免疫健康蛋鸡的初产蛋，这种卵黄抗体，不仅制备方法易于操作，适合大规模生产，且制备的鸭细小病毒卵黄抗体性质稳定、纯度高、效价高、特异性较强，无药残，温和环保，对鸭细小病毒感染的预防及治疗极具应用价值，为鸭细小病毒卵黄抗体的制备提供了新的思路。

技术领域

本发明涉及生物制品领域，提供了一种防治鸭细小病毒的卵黄抗体及其制备方法。

背景技术

鸭细小病毒是细小病毒的一种，主要侵害1～3周龄的雏鸭，临床以腹泻、呼吸困难和脚软为主要症状，一年四季均有发生，给鸭饲养带来极大的经济损失，是鸭饲养中主要的疾病之一，发病率和死亡率也较高。

2015年3月以来，我国山东、江苏和安徽等地肉鸭群出现了一种疾病，该病以鸭喙发育不良，舌头外伸为特征，本病主要发生在14日龄以上的商品鸭，鸭群发病率为10％-20％，最高可达50％，大群感染率最高可达100％，但该病不造成患鸭死亡。患鸭发育迟缓，体温略升高，喙短，弹性降低，舌肿胀，外伸，感染后期患鸭胫骨和翅骨易发生骨折。该病主要导致鸭群料肉比上升，养殖成本升高，鸭出栏合格率降低。对肉鸭养殖业造成巨大的经济损失。

禽类卵黄中的抗体主要是卵黄免疫球蛋白，与血清抗体相比，卵黄抗体具有许多独特的优点：

(1)无需采血，只需收集免疫种鸭产下的蛋即可纯化得到卵黄抗体；

(2)有良好的稳定性，且耐热耐酸，常温下仍能保持一定的活性；

(3)治疗效果明显，特异性强，且易大规模生产；

(4)安全、高效、无残留、温和环保。

因此，开发一种安全有效的鸭细小病毒卵黄抗体迫在眉睫。

发明内容

针对上述情况，本发明的发明人提供了一种防治鸭细小病毒的卵黄抗体及其制备方法，所述的卵黄抗体来源于使用鸭细小病毒活疫苗和鸭细小病毒灭活疫苗高强度联合免疫健康蛋鸡的初产蛋，这种卵黄抗体，不仅制备方法易于操作，适合大规模生产，且制备的鸭细小病毒卵黄抗体性质稳定、纯度高、效价高、特异性较强，无药残，温和环保，对鸭细小病毒感染的预防及治疗极具应用价值，为鸭细小病毒卵黄抗体的制备提供了新的思路。

发明人首先获得了一株新的鸭细小病毒，命名为鸭细小病毒GT2015株，发明人对该毒株进行了生物保藏，保藏单位为中国典型培养物保藏中心，生物保藏编号为CCTCC No：V201527，发明人发现该毒株为中等毒力分离株，无法直接作为活疫苗使用，因此发明人将该毒株经鸭胚克隆纯化传代40代次，获得了的一株新的弱毒疫苗株，命名为GT2015v，并对该弱毒疫苗株进行了生物保藏，保藏单位为中国典型培养物保藏中心，生物保藏编号为CCTCC No：V201528。

在分离获得上述两株毒株的基础上，发明人获得了GT2015的灭活疫苗和GT2015v的活疫苗，利用上述两种疫苗，发明人提供了所述卵黄抗体的制备方法，具体步骤如下：

(1)蛋鸡开产前高免：先后使用鸭细小病毒活疫苗和鸭细小病毒灭活疫苗高强度联合免疫健康蛋鸡；

(2)采集高免初产种蛋：采集经高免的蛋鸡群开产1个月以内的初产蛋；

(3)清洁消毒：将采集到的高免初产种鸡蛋清洁后用消毒液浸泡3-5分钟，晾干；

(4)无菌分离卵黄：在无菌条件下，打开蛋壳，倒出蛋内容物，分离卵黄；

(5)稀释：在无菌条件下，按照体积比为3.5∶6.5的比例向卵黄中加入含有庆大霉素和分析纯甲醛的生理盐水；

(6)搅拌过滤：在无菌条件下将卵黄稀释液搅拌成悬液，然后经50目滤膜过滤；