[发明专利]一种用于大肠杆菌定量检测的选择性培养基及大肠杆菌定量检测方法

权利要求书

1.定量检测大肠杆菌的非疾病诊断方法，其特征在于：步骤如下：将待检测细菌样品接种到用于大肠杆菌定量检测的选择性培养基中，于无氧条件下，25-44℃，150-280rpm，培养7-15h后检测菌液pH值，根据菌液pH值和大肠杆菌初始浓度关系标准曲线计算出样品中大肠杆菌的数量；

所述用于大肠杆菌定量检测的的选择性培养基的组成为：乳糖：10~26g/L，蛋白胨：15~25g/L，牛胆盐：1~7g/L，羧甲基纤维素钠：0.01~0.90g/L，氯化钠:2~7g/L，磷酸氢二钾：2.5~7.5g/L；

所述菌液pH值和大肠杆菌初始浓度关系标准曲线中一系列细菌样品的浓度范围是：1-10000cfu/ml；

其中：拟合获得菌液pH值和大肠杆菌初始浓度关系标准曲线时，对大浓度段进行单独拟合得到大浓度时菌液pH值和大肠杆菌初始浓度的对数值的线性关系曲线c₂（x₂，y₂）——x₂大肠杆菌初始浓度的对数值，y₂为菌液pH值；所述的大浓度是：大肠杆菌的浓度位于10-10000cfu/ml；

相应地，在求算待测样品中大肠杆菌初始浓度时根据菌液pH值，选用大浓度时菌液pH值和大肠杆菌初始浓度的关系曲线的关系曲线c₂（x₂，y₂），结合培养该待测样品后的菌液的pH值计算待测样品中大肠杆菌初始浓度。

2.根据权利要求1所述的定量检测大肠杆菌的非疾病诊断方法，其特征在于：所述菌液pH值和大肠杆菌初始浓度关系标准曲线的获得方法如下：

a.配制一系列浓度的大肠杆菌溶液；

b.将步骤a中配制的一系列浓度的大肠杆菌溶液分别接种到选择性培养基中，25-44℃，150-280rpm，培养7-15h后检测菌液pH值：

c.拟合得到菌液pH值和大肠杆菌初始浓度关系标准曲线c（x，y）——x大肠杆菌初始浓度，y为菌液pH值。

3.根据权利要求1或2所述的定量检测大肠杆菌的非疾病诊断方法，其特征在于：培养条件为：30-39℃，200-250rpm。

4.根据权利要求1或2所述的定量检测大肠杆菌的非疾病诊断方法，其特征在于：接种培养10-14h后检测菌液pH值。