[发明专利]一种含有放线菌的生防制剂的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及生防制剂的制备领域，尤其涉及一种含有放线菌的生防制剂的制备方法。

背景技术

放线菌是一类生长在土壤、植物体表及内部，还有淡水或海洋中的微生物类群，是人们研究最早并广泛应用于农业生产中的微生物。目前发现的抗生素产生菌，绝大多数为放线菌，而80％以上得抗生素都来自链霉菌属。链霉菌主要存在于土壤当中，其孢子萌发后首先形成基内菌丝，接着分化成气生菌丝，气生菌丝形成孢子链，再形成成熟孢子。环境条件不适宜时链霉菌能够形成孢子，转入休眠状态，因此链霉菌能够适应多种环境。

目前得到的放线菌主要从土壤中筛选获得。市面上，通常将对病原菌具有抑制作用的生防链霉菌制成不同的制剂，如孢子粉剂、种衣剂、菌丝体培养物等固体剂型。上述剂型有利于生防菌剂的商业化生产、运输和保存，但是使用时往往需要活化，使用不便；如果直接使用，可能防控效果受到影响。

三七为五加科人参属植物，是中国特有的名贵中药材，也是我国最早的药食同源植物之一，尤其是三七的块根具有重要的医用价值。三七对生长的环境条件有特殊要求，适宜于冬暖夏凉的气候，不耐严寒与酷热，喜半阴和潮湿的生态环境。由于上述物种特性，需要长期遮荫种植、灌溉强度大而至土壤湿度高，土壤的结构与根际微生物群落发生着剧烈变化。有害病菌大量繁殖，从而引起作物病害的流行与爆发，造成严重减产、甚至绝收。目前为了控制三七的病害流行，通常在种植过程中使用大量农药，易引起农药残留、降低三七品质等问题。因此，提供一种适于三七的生防制剂是非常迫切而且必要的。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种含有放线菌的生防制剂的制备方法，利用该种方法制备的含有放线菌的生防制剂可以适用于三七，并能有效控制三七的病害、显著提高三七的产量和品质。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：

一种含有放线菌的生防制剂的制备方法，包括以下步骤：

1)配制1L培养基，所述培养基包括以下组分：30g/L黄豆粉、8g/L淀粉、3g/L蔗糖、2g/L酵母粉、2g/L氯化钠、1g/L磷酸氢二钾、0.2g/L MgSO₄·7H₂O、0.01g/L硫酸锌、0.01g/L FeSO₄·7H₂O，pH为7.2；配制完成后121℃灭菌30min；

2)按照质量百分比7％-10％接种放线菌，培养温度为30℃，培养时间为24h，转速为150rpm；

3)按照1℃/h的速率，将温度降至24℃，之后培养12h；

4)配制500g/L的红糖溶液，过滤灭菌；

5)向培养基中添加60mL上述过滤灭菌的红糖溶液，温度为24℃，培养48h；

6)收集，包装，制得含有放线菌的生防制剂。

本发明所述含有放线菌的生防制剂的制备方法具备步骤简单、防控效果好、使用方便、见效快等有益效果，具体表现如下：

1、本发明严格控制了培养条件，例如，选择150rpm作为培养的转速，既能够保证混匀效果好、有利于放线菌吸收营养物质，又能够不破坏放线菌自身的菌体结构；与传统的培养放线菌在培养时始终处于同一温度条件相比，本发明首次提出了先高温度培养再梯度降温的培养模式，经试验表明，本发明所述的培养模式可以提高放线菌的防控效果，提高植物(尤其是三七)的产量和品质；

2、本发明在底料的培养基中添加的蔗糖，后期将温度降至24℃并在此温度培养12h后，又补加了红糖，经试验表明，采用这种方法制备的生防制剂中的活菌数角度，并可以显著提高放线菌活力以及防控效果，提高植物(尤其是三七)的产量和品质；

3、本发明所述的上述方法制备的含有放线菌的生防制剂的剂型为液体，并未按照一般的生防制剂的制备方法进行干燥处理，具有以下优点：1)简化了制备工艺、降低了制备成本；2)仍然保留了较长的保存时间，将本发明制备的含有放线菌的生防制剂置于4℃可以稳定保存半年以上，猜测可能的原因是培养基的底料以及培养培养的过程中加入较多的糖类物质故渗透压较高有利于保存；3)使用方便，使用时只需要将本发明制备的生防制剂喷洒在植物的根部土壤处即可，易于放线菌发挥作用、见效较快。

在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进。

进一步，所述放线菌为康照1号，购自杨凌康照农业开发有限公司。

进一步，所述生防制剂中活菌数为5×10¹⁰至6×10¹⁰个/克。