[发明专利]脂肪酶变体

说明书

本发明涉及脂肪酶变体，具体地提供变体脂肪酶，优选地，通过在亲本脂肪酶中鉴定的一个或多个区域中引入突变而获得的产生气味的趋势降低的变体。

本发明申请是基于申请日为2007年1月22日，申请号为200780002901.2(国际申请号为PCT/US2007/060841)，名称为“脂肪酶变体”的发明专利申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及脂肪酶变体。

背景技术

脂肪酶是有用的，例如，作为洗涤剂酶用于从衣物和其它纺织品去除脂质或脂肪沾污，作为用于面包和其它烘焙产品的生面团的添加剂。因此，源自细毛嗜热霉(Thermomyces lanuginosus)(同物异名疏棉状腐质霉(Humicola lanuginosa)，EP 258068和EP 305 216)的脂肪酶以商品名(Novo Nordisk A/S的产品)以洗涤剂用途出售。WO 0060063描述了细毛嗜热霉脂肪酶的变体，其在洗涤剂溶液中具有特别优良的初次洗涤性能(first-wash performance)。WO 9704079、WO 9707202和WO 0032758也公开了细毛嗜热霉脂肪酶的变体。

在一些应用中，感兴趣的是将产生气味的短链脂肪酸的形成降至最低。因此，已知的是含有脂肪酶的洗衣洗涤剂有时可能在以牛奶污染的织物上留下残留的气味(EP430315)。WO 02062973公开了脂肪酶变体，其中通过附接(attaching)C末端延伸减少了气味的产生。

发明内容

发明人发现，通过在脂肪酶的某些区/位置引入突变，可改进脂肪酶的性质或特征。

在优选实施方案中，本发明涉及用于洗涤剂具有改进性能的脂肪酶。例如，本发明通过在亲本脂肪酶中鉴定的一个或多个区中引入突变而获得的产生气味的倾向降低的变体。在另一个优选实施方案中，本发明提供脂肪酶变体，与亲本脂肪酶相比，其产生气味的可能降低而无C末端延伸的附接。

在另外的方面中，本发明涉及编码本发明脂肪酶变体的DNA序列，携带所述DNA序列的表达载体和包含DNA序列或表达载体的转化宿主细胞。

在另一个方面，本发明提供产生本发明脂肪酶变体的方法。

具体地，本发明涉及如下各项：

1.亲本脂肪酶的变体，其中变体包含至少三个选自下组的取代(使用SEQ ID NO:2编号)：

a)I区中的至少两个取代，和

b)II区中的至少一个取代，和

c)III区中的至少一个取代，和

d)IV区中的至少一个取代；

和其中所述变体具有脂肪酶活性。

2.项1的脂肪酶变体，其中亲本脂肪酶的I区中至少两个取代包含在对应于位置231和233的位置的氨基酸的取代(使用SEQ ID NO:2编号)。

3.项2的脂肪酶变体，其中亲本脂肪酶的I区中至少两个取代包含在对应于位置231和233的位置的用氨基酸R的取代(使用SEQ ID NO:2编号)。

4.根据项1的脂肪酶变体，其变体脂肪酶与SEQ ID NO:2至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％相同。

5.根据项1的脂肪酶变体，其中亲本脂肪酶是具有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的脂肪酶。

6.根据项2的脂肪酶变体，其中所述脂肪酶在对应于SEQ ID NO:2的位置4和/或位置227的位置包含其它取代。

7.根据项6的脂肪酶变体，其中脂肪酶具有对应于X4V和X227G的取代(使用SEQ IDNO:2编号)。