[发明专利]金银花HQT基因冷诱导型启动子有效

专利信息
申请号: 201510613599.0 申请日: 2015-09-23
公开(公告)号: CN105087592B 公开(公告)日: 2017-10-24
发明(设计)人: 向凤宁;由娟娟;杨丹 申请(专利权)人: 山东大学
主分类号: C12N15/113 分类号: C12N15/113;C12N15/82;A01H5/00
代理公司: 济南圣达知识产权代理有限公司37221 代理人: 李健康
地址: 250061 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 金银花 hqt 基因 诱导 启动子
【说明书】:

技术领域

发明涉及一种启动子,尤其涉及一种金银花HQT基因冷诱导型启动子。

背景技术

山东道地药材金银花(Lonicera japonica Thunb.)是忍冬科忍冬属(Lonicera)植物,具有抑菌、抗病毒、解热、抗炎、保肝、止血、抗氧化、免疫调节等作用。它含有的多种生物活性成分中,绿原酸类化合物被认为是其主要的有效成分,其含量高低是评价金银花质量的重要指标。因此,利用基因工程提高绿原酸含量对改善金银花品质有重要意义。(赵琰玲,伊莲.金银花化学成分与有效成分提取研究进展.药学导报,2007,26(5):521~523)

近年来,对不同植物中的绿原酸合成的研究表明,绿原酸生物合成有三条可能的途径,其中通过羟基化肉桂酸辅酶A:奎宁酸肉桂酸羟基化转移酶(hydroxycinnamoyl CoA quinate hydroxy-cinnamoyl transferase,HQT)(Ulbrich,1979)能催化咖啡酰辅酶A和奎宁酸生成绿原酸,为合成绿原酸主要合成途径。在富含绿原酸的植物如西红柿、烟草、朝鲜蓟、咖啡和金银花中都有HQT基因存在,HQT表达的组织部位与绿原酸在植物中的分布部位具有相关性,它的表达量高低也关系到绿原酸含量高低。通过瞬时和稳定转基因技术,在过表达HQT基因的植物体内都发现绿原酸含量明显提高,植物自身抗病性和抗氧化胁迫也大大增强。(LIU Ying,PENG Xiao-xiao.Researches on the Relative Expression of HQT Gene in Different Organs of Lonicera japonica.Journal of Chinese Medicinal Materials,2012,35(7);CléC1,Hill LM.Modulation of chlorogenic acid biosynthesis in Solanum lycopersicum;consequences for phenolic accumulation and UV-tolerance.Phytochemistry,2008 69(11):2149-56;何柳,陈士林.植物中绿原酸合成途径研究进展.药物生物技术,2013,20(5):463~466)利用生物技术手段提高植物中绿原酸含量,再结合化合物分离提取方法,将是大规模获得绿原酸的可靠途径。

植物能够根据外界环境变化调控不同基因的表达以适应不同的生境变化。启动子控制着基因表达的开始,也很大程度上决定了基因表达的强度,在转录水平上调控着基因的时空和量的表达。植物启动子由核心元件和上游元件构成,如TATA-box和起始因子。在逆境相关基因的启动子序列中还存在一些与逆境诱导相关,参与基因转录调控的顺式作用元件。目前研究较深入的有:脱落酸响应元件(ABA-responsive element,ABRE)、乙烯响应元件(ethylene-responsive element,ERE)、茉莉酸类物质应答元件(jasmonate-responsive element,JRE)、低温响应元件(low-temp rature reponsive element,LTRE)和干旱应答元件(dehydration-responsive element,DRE)等。(朱丽萍,于壮,等.植物逆境相关启动子及功能.遗传.2010,32(3):229-234)对植物启动子的研究有助与了解基因转录调控表达模式和其调控机制,且对特异性及诱导性启动子的研究,有助得到正常高效的转基因植物。

发明内容

针对现有技术的要求,本发明的目的是提供一种金银花HQT基因冷诱导型启动子。

本发明所述的金银花HQT基因冷诱导型启动子,是下列核苷酸序列之一:

1)序列表中SEQ ID No:1所示的DNA序列;

2)与序列表中SEQ ID No:1所示的DNA序列具有90%以上同源性,且具有相同功能的DNA序列。

优选的实施方式是:所述金银花HQT基因冷诱导型启动子的核苷酸序列是序列表中SEQ ID No:1所述的序列,其由1891个碱基组成。

再进一步,含有所述金银花HQT基因冷诱导型启动子的表达盒,表达载体和转基因植株体系也属于本发明的保护范围。

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