[发明专利]基于细胞周期调控增强高分子聚合物载体基因转染效率的方法有效
申请号: | 201510615642.7 | 申请日: | 2015-09-24 |
公开(公告)号: | CN105238815B | 公开(公告)日: | 2018-06-15 |
发明(设计)人: | 刘祥瑞;周雪飞;刘欣;祝鼎成;周珠贤;唐建斌;申有青 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85 |
代理公司: | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人: | 黄平英 |
地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 高分子聚合物 基因转染 细胞周期调控 载体基因 转染效率 目标基因 目标细胞 肿瘤细胞 复合物 同步化 外源 | ||
1.一种基于细胞周期调控增强高分子聚合物载体基因转染效率的方法,其特征在于,包括如下步骤:采用RO-3306为同步化试剂将目标细胞同步至G2/M边界,然后加入高分子聚合物载体-外源目标基因复合物进行基因转染;目标细胞同步步骤为:培养目标细胞至细胞贴壁后加入含RO-3306的血清培养基,进行同步,血清培养基中RO-3306浓度为8~12uM,同步时间为12~20h;
同步完成后,将含RO-3306的血清培养基替换为含RO-3306的无血清培养基,加入高分子聚合物载体-外源目标基因复合物进行转染,2~3h后再换成含RO-3306的血清培养基。
2.根据权利要求1所述基于细胞周期调控增强高分子聚合物载体基因转染效率的方法,其特征在于,转染时间为12~24h。
3.根据权利要求1所述基于细胞周期调控增强高分子聚合物载体基因转染效率的方法,其特征在于,所述目标细胞为HeLa细胞。
4.根据权利要求1所述基于细胞周期调控增强高分子聚合物载体基因转染效率的方法,其特征在于,所述高分子聚合物载体为聚乙烯亚胺。
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