[发明专利]一种裂殖壶菌发酵生产DHA的方法

权利要求书

1.一种裂殖壶菌发酵生产DHA的方法，包括将裂殖壶菌在发酵培养基中发酵制得DHA，其特征在于在所述发酵培养基中添加甜菜碱；其中，在发酵40～42h时，添加甜菜碱；

所述发酵培养基为葡萄糖母液200～250g·L^-1，酵母粉10～12g·L^-1，乙酸铵1.5～2g·L^-1，MgSO₄·7H₂O 4.5～5g·L^-1，KCl 0.5～0.8g·L^-1，CaCl₂·2H₂O 3.5～5g·L^-1，调pH 6.0～6.5；

所述发酵的培养条件为：接种量8～12％，培养温度23～27℃，通气量0.5～1vvm，发酵时间90～96h；发酵开始后，通过流加氢氧化钠和葡萄糖母液控制pH6.0～6.5；当菌体进入生长期时，通过控制搅拌转速使OUR维持在12～15mmol/L/H，当58～60h时，降低搅拌转速使OUR控制在8～12mmol/L/H至发酵结束；在发酵结束前16～20h停止补料，消耗发酵液中的残糖。

2.根据权利要求1所述的裂殖壶菌发酵生产DHA的方法，其特征在于所述甜菜碱在发酵培养基中的浓度为2～2.5g/L。

3.根据权利要求1所述的裂殖壶菌发酵生产DHA的方法，其特征在于在所述发酵培养前进行种子培养。

4.根据权利要求3所述的裂殖壶菌发酵生产DHA的方法，其特征在于所述种子培养的种子培养基为:葡萄糖母液100～140g·L^-1，酵母粉4.5～5.5g·L^-1，KH₂PO₄ 0.7～1g·L^-1，NaCl 4～8g·L^-1，MgSO₄·7H₂O 2～3g·L^-1，KCl 0.5～1g·L^-1，CaCl₂·2H₂O 0.5～1g·L^-1，pH 6.0～6.5。

5.根据权利要求3或4所述的裂殖壶菌发酵生产DHA的方法，其特征在于所述种子培养的培养条件为将保藏的斜面接种到种子培养基中，23～27℃、180～220r·min^-1培养42～45h。

6.根据权利要求1～4任意一项所述的裂殖壶菌发酵生产DHA的方法，其特征在于所述发酵结束后通过离心、絮凝或者过滤的方法收集菌体；然后将菌体通过挤压或酶解法破壁；接着利用非极性溶剂回收含二十二碳六烯酸的粗油，并通过精炼得到二十二碳六烯酸油脂。