[发明专利]一种人Dickkopf-1蛋白（DKK-1）定量检测试剂盒

权利要求书

1.一种人Dickkopf-1蛋白定量检测试剂盒，为1)或2)：

1)包括试剂A；

所述试剂A由异硫氰酸荧光素标记的DKK-1单克隆抗体溶液和碱性磷酸酶标记DKK-1单克隆抗体溶液组成，其中，异硫氰酸荧光素标记DKK-1单克隆抗体和碱性磷酸酶标记DKK-1单克隆抗体的质量比为1：8；

所述异硫氰酸荧光素标记的DKK-1单克隆抗体溶液和所述碱性磷酸酶标记DKK-1单克隆抗体溶液的溶剂均为抗试剂缓冲液；

所述抗试剂缓冲液按照如下方法制备：将溶液A、羊血清2、牛血清、马血清、防腐剂和阻断剂混匀得到抗试剂缓冲液；

所述溶液A由Na⁺、Mg²⁺、Zn²⁺、Trizmabase、叠氮钠、羊血清1、牛血清白蛋白和水组成；

2)包括所述异硫氰酸荧光素标记的DKK-1单克隆抗体、所述碱性磷酸酶标记DKK-1单克隆抗体和所述抗试剂缓冲液。

2.根据权利要求1所述试剂盒，其特征在于：

所述防腐剂为Proclin-300，所述阻断剂为HBR1水溶液；

所述抗试剂缓冲液中，所述溶液A、所述羊血清2、所述牛血清、所述马血清、所述Proclin-300和所述HBR1水溶液的配比为500g-1200g：1mL-10mL：10mL-80mL：3mL-10mL：0.1mL-5mL:1.5mL-5mL；所述HBR1水溶液的浓度为20-30mg/mL；

所述溶液A中，所述Na⁺质量百分含量为0.1％-1％；所述Mg²⁺质量百分含量为0.1‰-0.5‰；所述Zn²⁺质量百分含量为0.01‰-0.05‰；所述羊血清1体积百分含量为0.1％-0.5％；所述叠氮钠质量百分含量为0.1-0.5％；所述Trizmabase浓度为0.05-0.5mol/L；所述牛血清白蛋白的质量百分含量为0.4％-2％。

3.根据权利要求1或2所述试剂盒，其特征在于：

所述抗试剂缓冲液中，所述溶液A、所述羊血清2、所述牛血清、所述马血清、所述Proclin-300、所述HBR1水溶液的配比为1000g：3mL：30mL：5mL；0.521mL：2.44mL；所述HBR1水溶液的浓度为20.49mg/mL；

所述溶液A中，所述Na⁺源于NaCl，所述NaCl的质量百分含量为0.582％；

所述Mg²⁺源于MgCl₂，所述MgCl₂的质量百分含量为0.203‰；

所述Zn²⁺源于ZnCl₂，所述ZnCl₂的质量百分含量为0.0136‰；

所述羊血清1的体积百分含量为0.199％；

所述叠氮钠的质量百分含量为0.1％；

所述Trizmabase的质量百分含量为1.205％；

所述牛血清白蛋白的质量百分含量为0.498％。

4.根据权利要求1-3中任一所述试剂盒，其特征在于：

所述异硫氰酸荧光素标记的DKK-1单克隆抗体溶液由异硫氰酸荧光素标记的DKK-1单克隆抗体和所述抗试剂缓冲液组成，所述异硫氰酸荧光素标记的DKK-1单克隆抗体的浓度为0.1-0.5μg/mL；

所述碱性磷酸酶标记DKK-1单克隆抗体溶液由碱性磷酸酶标记DKK-1单克隆抗体和所述抗试剂缓冲液组成，所述碱性磷酸酶标记DKK-1单克隆抗体的浓度为0.5-2μg/mL；

所述异硫氰酸荧光素标记的DKK-1单克隆抗体中的DKK-1单克隆抗体和所述碱性磷酸酶标记DKK-1单克隆抗体中DKK-1单克隆抗体不同。

5.根据权利要求1-4中任一所述试剂盒，其特征在于：

所述试剂盒还包括磁分离试剂；

所述磁分离试剂为将抗异硫氰酸荧光素抗体共价连接在磁珠表面，得到磁分离试剂；

所述抗异硫氰酸荧光素抗体为多克隆抗体；

所述抗异硫氰酸荧光素抗体和所述磁微粒的配比为30μg-200μg：1mg；

所述磁微粒的直径为0.5-1.5μm。