[发明专利]一种金葵花愈伤组织的培养方法

权利要求书

1.一种金葵花愈伤组织的培养方法，其特征在于包括以下步骤：(1)、种子消毒：将金葵花种子浸种后吸干种子表面的水分，然后采用氯气消毒；

(2)、将消毒后的种子接种在无菌苗培养基上，接种后放置于恒温黑暗环境中，使种子萌发，萌发后移至恒温温室中继续生长；所述无菌苗培养基由MS培养基、蔗糖和琼脂组成，pH为5.8～6.0；

(3)、选取播种后10～15天的无菌苗的子叶和真叶为外植体，切去叶片边缘后放置在诱导培养基上并用钝头镊子轻按叶片表面使其紧贴诱导培养基表面，用双层石蜡封口膜封口；

(4)、外植体接种后放置在28℃恒温生化培养箱中培养，培养至出现愈伤组织；

(5)、切下愈伤组织转接至继代培养基中继续培养，培养至愈伤组织生长达到稳定期，完成培养；所获得的愈伤组织形态稳定，用于研究多倍体育种和细胞学实验。

2.根据权利要求1所述的金葵花愈伤组织的培养方法，其特征在于：步骤(1)中浸种具体为将金花葵干种子在50℃恒温水浴锅中浸泡30min，氯气消毒时间为4h。

3.根据权利要求1所述的金葵花愈伤组织的培养方法，其特征在于：步骤(2)中无菌苗培养基位于锥形瓶中，其厚度为0.5cm；锥形瓶选择50mL、100mL或250mL规格，50mL和100mL锥形瓶接种1～2粒种子，250mL锥形瓶接种3～6粒种子，所述无菌苗培养基中蔗糖的浓度为30g/L，琼脂的浓度为8g/L。

4.根据权利要求1所述的金葵花愈伤组织的培养方法，其特征在于：步骤(2)中培养温度为25℃。

5.根据权利要求1所述的金葵花愈伤组织的培养方法，其特征在于：所述的诱导培养基和继代培养基成分相同，由MS培养基、2,4-D、6-BA以及KT组成，pH为5.8～6.0，其中2,4-D浓度为2.1mg/L，6-BA浓度为0.75mg/L，KT浓度为2.0mg/L。