[发明专利]一种复合静电纺丝纳米纤维膜及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种搭载药物控释微球的复合静电纺丝纳米纤维膜的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）制备包埋碱性成纤维因子bFGF的聚乳酸-羟基乙酸共聚物PLGA微球；

（2）分别制备聚己内酯/壳聚糖静电纺丝液、聚己内酯静电纺丝液、明胶静电纺丝液；

（3）电纺丝法制备PCL/CS-PLGA微球- PCL/GE静电纺丝纳米纤维膜即为所述的搭载药物控释微球的复合静电纺丝纳米纤维膜；

其中，所述的电纺丝法制备PCL/CS-PLGA微球- PCL/GE静电纺丝纳米纤维膜的方法为：首先将配制好的聚己内酯/壳聚糖静电纺丝液注入注射器，注射器固定于静电纺丝装置的微量注射泵上，电源阳极输出端与针头相连，阴极输出端与金属接收板相接，混合溶液在静电力的作用下从针尖喷出,接收板表面形成PCL/CS纳米纤维膜；纺丝完毕后，将包埋碱性成纤维因子bFGF的聚乳酸-羟基乙酸共聚物PLGA微球溶入70%乙醇溶液中，使其中PLGA微球质量百分含量为4%-10%，用微量滴管将微球溶液均匀涂抹在PCL/CS纳米纤维膜表面，再进行PCL/GE电纺，两根注射器分别抽取所述的聚己内酯静电纺丝液以及所述的明胶静电纺丝液，采用双喷头电纺技术在涂抹了PLGA微球的底层PCL/CS纳米纤维膜上静电纺PCL/GE混合纤维支架，从而制备PCL/CS-PLGA微球- PCL/GE静电纺丝纳米纤维膜初品，将初品置于真空冷冻干燥机中冻干得PCL/CS-PLGA微球- PCL/GE静电纺丝纳米纤维膜成品。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的包埋碱性成纤维因子bFGF的聚乳酸-羟基乙酸共聚物PLGA微球制备方法如下：

将水溶性的碱性成纤维因子bFGF 按90-120ng/ml溶于生理盐水中作为内水相W1，聚乳酸-羟基乙酸共聚物PLGA 溶于二氯甲烷中作为油相O，油相中 PLGA 浓度为8-12mg/mL， 质量百分含量2%的聚乙烯醇PVA 水溶液作为外水相W2， W1：O：W2的体积比为15∶2∶40-60；将 W1逐滴滴入O中，以高速匀浆机在 30,000r/min 下乳化1-2min 形成初乳W1/O，待初乳稳定后，将初乳液滴入外水相W2中，15,000r/min 下搅拌3min 形成复乳W1/O/W2；然后将复乳液倒入烧杯中，20-28℃下磁力搅拌挥发 3-5h，过滤， 3,500-5,000r/min 离心 15-20min，去离子水洗涤、过滤后再离心，如此反复操作 3-5 遍，直至将多余的 PVA 清除，将样品-20℃冷冻保存至少 48h；冷冻干燥 22-26h得所述的聚乳酸-羟基乙酸共聚物PLGA微球。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的聚己内酯/壳聚糖静电纺丝液通过以下方法制备：把壳聚糖CS和聚乙二醇PEG质量比为2-6：1的混合粉末溶于90% 的冰醋酸水溶液中配制成总质量百分含量4% 的溶液，然后加入聚己内酯PCL, 磁力搅拌溶解, 配制成CS 与PCL 质量比为1:1-3的聚己内酯/壳聚糖静电纺丝液。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于所述的壳聚糖CS的 重均分子量为 （3-8）×10⁵， 脱己酰度为90%；聚己内酯PCL平均分子量为（5-10）×10⁴ ；聚乙二醇 PEG的重均分子量为 （0.8-1.2）×10⁴。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的聚己内酯静电纺丝液的制备方法为：将聚己内酯PCL溶解于二氯甲烷和二甲苯混合溶剂中，得到所述的聚己内酯静电纺丝液；其中聚己内酯PCL与二氯甲烷和二甲苯混合溶剂的质量体积比为1g:8~12ml；所述的二氯甲烷和二甲苯混合溶剂由二氯甲烷溶液和二甲苯按6~9:1的体积比混合而成。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的明胶静电纺丝液的制备方法为：将0.60 g明胶GE溶解于甲酸和乙酸乙酯混合溶剂中，得到所述的明胶静电纺丝液；其中明胶与甲酸和乙酸乙酯混合溶剂的质量体积比为1g：3~8ml，所述的甲酸和乙酸乙酯混合溶剂由甲酸溶液和乙酸乙酯按照1~3:1的体积比混合而成。