[发明专利]一种从银耳废菌包中提取木聚糖酶的方法

说明书

本发明公开了一种从银耳废菌包中提取木聚糖酶的方法，其属于生物发酵工程领域，具体是将银耳废菌包加水提取后，利用硫酸铵对提取液进行盐析，再经透析除盐后利用DEAE‑纤维素柱层析进行纯化，得木聚糖酶。本发明原料来源广泛、廉价，提取方法简单，所得木聚糖酶的比活力高达8091U/mg，不仅可在很大程度上实现银耳废菌包的循环再利用，减少资源浪费，也扩展了木聚糖酶的来源，具有较好推广价值。

技术领域

本发明属于生物发酵工程领域，具体涉及一种从银耳废菌包中提取木聚糖酶的方法。

背景技术

木聚糖酶是一组降解木聚糖的酶，其具有很大的应用前景，已被广泛应用于制浆和造纸、医药和化工、纺织、食品、能源、环保、酿酒与饲料等各行各业。目前，许多诸如来源于曲霉、木霉和芽孢杆菌的木聚糖酶已被成功商业化生产。现有研究中，产木聚糖酶活力较高的微生物主要有，细菌里的中度嗜盐菌AX2000(Bacillus alcalophilus AX2000)，它产生的木聚糖酶活性高达25000U/mg；放线菌里的橄榄绿链霉菌A1，它产生的木聚糖酶活性高达15000U/mL；真菌里的青霉菌Pol6(Penicillium occitanis Pol6)和黑曲霉BCC14405(Aspergillus niger BCC14405)，它们产生的木聚糖酶活性分别为8549.85和8007U/mg。在木聚糖酶产量方面，真菌与细菌相比具有明显的优势。但是真菌中青霉菌和黑曲霉在产木聚糖过程中常常会伴随着毒素的产生，使木聚糖酶在应用上具有一定的隐患。

银耳（Tremella）又称作白木耳、雪耳、银耳子等，属于真菌类银耳科银耳属，是门担子菌门真菌银耳的子实体，有“菌中之冠”的美称。银耳子实体纯白至乳白色，直径5～10厘米，柔软洁白，半透明，富有弹性。具有强精、补肾、润肺、生津、止咳、清热、养胃、补气、和血、强心、壮身、补脑、提神的功效。目前已经开发了银耳糖浆、口服液等产品，取得了良好的经济效益。

由于银耳功效明显，口感良好被消费者广泛接受。每年的产量与销量节节升高，已经成为食用菌市场的主要产品之一。但是银耳采摘完后会伴随着大量废弃培养料的产生，古田县是银耳主产区，年生产银耳2亿袋以上，每年有10万吨的废菌糠。而从目前情况来看，我国对银耳菌渣的处理多是用做燃料或随意丢弃，这不但浪费了宝贵的生物资源，同时也带来了严峻的环境问题。因此，如何有效开发和合理利用银耳菌渣资源，是银耳行业亟待解决的问题。

通过研究表明，银耳在栽培过程中会产生大量的栽培料降解酶，其中木聚糖酶活力最高，可达200U/g（鲜料），具有很大的提取和应用价值。本发明通过对银耳废菌包中木聚糖酶的提取、分离与纯化，可将木聚糖酶比活力成功提高至8091U/mg，这不仅在很大程度上实现了银耳废菌包的循环再利用，也扩展了木聚糖酶的来源。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从银耳废菌包中提取木聚糖酶的方法，其不仅可在很大程度上实现银耳废菌包的循环再利用，减少资源浪费，也扩展了木聚糖酶的来源，具有较好推广价值。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种从银耳废菌包中提取木聚糖酶的方法，是将银耳废菌包加水提取后，利用硫酸铵对提取液进行盐析，再经透析除盐后利用DEAE-纤维素柱层析进行纯化，得木聚糖酶。

其具体操作包括以下步骤：

1）粗酶液的提取：将刚采完银耳的废菌包倒入不锈钢锅中，充分混匀后按料液比1:5加水，于25℃、150rpm摇床上放置浸提2-3h，用八层纱布过滤去渣后，将滤液于25℃离心机中10000rpm离心20min，取上清液；