[发明专利]一种利用平常假丝酵母生产调香液的方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种利用平常假丝酵母生产调香液的方法。

背景技术

众所周知，酱香型白酒其独特的酿造工艺形成了酒醅中特殊的微生物区系，包括酵母、细菌和霉菌，白酒是很多种香味成分组成的集合体，其表现出来的不仅是单体香味，更重要的是复合香味，两种以上香味物质相混合，不但改变了单体所特有的香味，有时还呈现出相乘作用。白酒香味成分种类有：醇类、酯类、酸类、醛酮类化合物、缩醛类、芳香族化合物、含氮化合物和呋喃化合物等。醇类中除乙醇外，最主要的是异戊醇、异丁醇和正丙醇，在浓香型和酱香型白酒中还含有一定量的正丁醇，属于醇甜和助香剂的主要物质来源，对形成酒的风味和促使酒体丰满、浓厚起着重要的作用。在白酒酿造的微生物区系中酵母在缺氧的情况下将糖类分解为二氧化碳和酒精及其余醇类物质等，其中一类产香酵母又称为产酯酵母，它是中国白酒中酯香的主要产生菌。产香酵母能够以乙醇为碳源，既具备乙醇发酵能力，又具备醋酸发酵能力，能够产生以酯香为主的多种香味。其中可以以糖、醛、有机酸、盐类为养料，在酯酶作用下合成酯类。目前在白酒酿造过程中生香酵母研究较多的有鲁氏接合酵母、多变假丝酵母、清香型汉逊酵母及球拟酵母。生香酵母适用于各种白酒的生产，其主要作用是产酯增香，除杂味，使得酒体协调，改善白酒质量，从酱香型酒醅中分离出产香酵母再应用到生产，对酿造出酯香更浓的美酒，提高酒的品质非常有意义，但目前用于产香微生物生产调香液的研究报道几乎没有，因此开展这方面研究对于白酒生产和其它食品增香具有很好的实用性。

发明内容

本发明的目的在于克服上述缺点而提供的一种生产周期短、优质品率高、生产成本低的利用平常假丝酵母生产调香液的方法。

本发明的一种利用平常假丝酵母生产调香液的方法，包括以下步骤：

（1）斜面培养：将平常假丝酵母FBKL2.0003（CandidainconspicuaFBKL2.0003）菌种接种于斜面培养基上，在28℃下培养24-48h，待菌丝长满试管；

（2）菌种活化：将斜面培养的菌种在麦芽汁琼脂培养基上划线活化，在28℃下培养24-48h；

（3）种子液制备：配制液体培养基（麦芽膏粉130g/L,氯霉素0.1g/L,PH5.8-6.2），三角瓶盛装，115℃灭菌20min，然后在超净工作台接入活化的菌种到液体培养基中，在28℃摇床上培养24-48h；

（4）三角瓶固态发酵：采用高粱麦粒培养基，小麦1:1粉碎，高粱3:1粉碎，再以高粱：小麦质量比为1:1混料；接着90℃热水润粮4h，其中加水量40%-50%；将培养基盛装放入灭菌锅内121℃准确蒸煮20min；待培养基冷却到60±2℃加入糖化酶（200u/g-250u/g），调节pH4.0-4.5，在60±2℃水浴锅糖化4h；装瓶，灭菌；灭菌完成待培养基冷却至40±2℃后，往三角瓶中接入质量百分比为4-8%的种子液，搅拌均匀，在28℃下恒温培养7d，以后每隔8-12h扣瓶一次；

（5）调香液的制备：

（a）配制浓度为26.47%（按36gNacl溶于100ml蒸馏水的配比）的食盐水溶液200ml，过滤备用，再配制体积深度为10%乙醇溶液（按90ml蒸馏水加10ml无水乙醇的配比）200ml；

（b）准确称取50-150g发酵品置于圆底烧瓶中并加入玻璃珠和小碎瓷片；

（c）向圆底烧瓶中加入与发酵品按1g：1ml：1ml的食盐水和10%乙醇溶液，搅拌均匀，搅拌时间持续5min-10min，再将烧瓶置于50℃水浴锅中水浴30min；

（d）连接好蒸馏装置，在圆底烧瓶的顶部用封口膜密封，插入量程为0℃-100℃的温度计，常压蒸馏，控制温度100℃，待有馏分馏出时计时，蒸馏时间为20-40min，收集馏分25-75ml于容量瓶中，置于4℃冰箱冷藏保存。

上述的一种利用平常假丝酵母生产调香液的方法，其中斜面培养基为麦芽汁琼脂培养基：麦芽膏粉130g/L,氯霉素0.1g/L,琼脂15g/L,PH5.8-6.2；种子液制备采用液体培养基：麦芽膏粉130g/L,氯霉素0.1g/L,PH5.8-6.2。

平常假丝酵母FBKL2.0003（CandidainconspicuaFBKL2.0003）已于2015年6月17日保藏到中国典型培养物保藏中心（地址：中国武汉武汉大学），保藏号：CCTCCNO：M2015381。