[发明专利]一种准确度高的前白蛋白免疫比浊法检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及临床体外检测试剂技术领域，特别涉及一种前白蛋白检测试剂，还涉及使用此检测试剂的检测方法。

背景技术

前白蛋白，又被称为转甲状腺素蛋白，由肝细胞合成。它是由4个相同亚基组成的四聚体，分子量为55.0kD，含糖量0.5%，含色氨酸3.15%。前白蛋白具有重要的生物学活性。它与甲状腺素结合球蛋白以及白蛋白协同参与甲状腺素的运转。它在甲状腺激素运转过程中的作用仅次于甲状腺素结合球蛋白（TBG）。TBG负责转运甲状腺激素总量的70%-75%，前白蛋白则转运15%-20%，白蛋白转运的更少些。在正常生理状态下，甲状腺素几乎全部通过与这三种蛋白结合转运到达靶细胞。

前白蛋白另一重要功能是协助视黄醇结合蛋白（RBP）转运视黄醇。当机体需要维生素A时，贮存在肝脏中的视黄醇酯被水解，游离的视黄醇与RBP结合，被分泌到血液循环中，再与PA结合，所形成的视黄醇-RBP-PA大分子结合物，通过循环转运到有特异性RBP受体结合部位的靶组织中。一旦进入靶细胞，视黄醇-RBP-PA结合物即分离。

血清前白蛋白能敏感反映肝脏蛋白质代谢情况，它比白蛋白更能早期反应肝细胞损害，它的血清浓度明显受营养状况及肝功能改变的影响，有30%患者白蛋白正常而前白蛋白降低，多数肝病患者前白蛋白均降低50%以上，所以前白蛋白被认为是判断早期肝脏损害的灵敏指标。此外，在预测晚期癌症患者生存时间方面，前白蛋白也是一项有价值的指标。

前白蛋白的检测方法主要有电泳法、单项免疫扩散法，免疫电泳法，免疫比浊法。其中，电泳法所测得的血清白蛋白并非真值；单项免疫扩散法和免疫电泳法虽然特异性高，但这两种方法操作较为繁琐，所需要的时间都较长，过度浪费资源；免疫比浊法是近年来应用最多，最有价值的检测方法。免疫比浊法以其测定原理，可分为散射比浊法和透射比浊法两类。散射比浊法是利用溶液中抗原抗体反应所形成的复合物颗粒被一定波长的光照射时，发生散射，通过检测散射光强度，计算出样品中前白蛋白的量。透射比浊法则是基于抗原抗体复合物颗粒形成后，使透射光减少，根据吸光度值推算前白蛋白量。前白蛋白免疫比浊法检测试剂盒原理是基于前白蛋白与前白蛋白抗体之间的反应。先将样本与缓冲液孵育，然后加入前白蛋白抗体试剂，在340nm波长下读取混合液的吸光度，与样本中前白蛋白的浓度成正比。免疫比浊法具有投资成本低，简单易操作，测试速快，精密度重复性好等优点，逐渐被广泛应用于临床体液中蛋白质含量检测的领域。但是普通的前白蛋白免疫比浊法存在灵敏度低，准确度低的问题，限制了进一步的该技术的推广。

发明内容

针对以上存在的问题，本发明提供一种检验前白蛋白的试剂以及使用该试剂检测前白蛋白含量的方法。该试剂盒采用免疫比浊法，可以有效检测血清中前白蛋白含量，并且准确度高，灵敏度较好。

本发明一种准确度高的前白蛋白免疫比浊法检测试剂盒，包括试剂R1和试剂R2，所述试剂R1和R2的组成如下：

试剂R1含有：

缓冲液200mmol/L

聚乙二醇-600010mmol/L

防腐剂6mmol/L

乙二胺四乙酸5mmol/L

牛血清白蛋白5mmol/L

试剂R2含有：

缓冲液200mmol/L

防腐剂6mmol/L

乙二胺四乙酸5mmol/L

吐温-201-5mmol/L

牛血清白蛋白5mmol/L

抗人前白蛋白抗体30mmol/L。

所述的前白蛋白检测试剂盒，试剂R1中缓冲液为25℃，pH为7.6的Tris-Hcl缓冲液。

所述的前白蛋白检测试剂盒，试剂R2中缓冲液为25℃，pH为7.6的Tris-Hcl缓冲液。

所述的前白蛋白检测试剂盒，所述防腐剂为庆大霉素。

所述前白蛋白检测试剂来检测前白蛋白的检测方法，使用全自动生化分析仪利用终点法进行测定，检测主波长为340nm。

所述的前白蛋白检测试剂盒，其特征在于采用新型表面活性剂是吐温-20。

所述的检测方法，R1试剂和R2试剂的比例为3:1。

本发明的有益效果：

1)添加稳定剂牛血清白蛋白，大大增强了试剂的稳定性；

2)采用新的防腐剂庆大霉素，有效解决了牛血清白蛋白容易滋长微生物的问题，并且大大减弱了化学防腐剂对于稳定剂牛血清白蛋白稳定性影响；