[发明专利]一种从桑叶中提取1-脱氧野尻霉素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及天然物提取技术领域，特别涉及一种从桑叶中提取1-脱氧野尻霉素的方法。

背景技术

我国桑树资源及产量均居世界首位，全国各地均有栽培。目前大部分地区将桑作为饲用栽培，每年入冬后随着冬蚕饲养减少，大量桑叶都被废弃。桑叶味苦、甘，性寒，归肺、肝经，具有疏风清热、平肝明目的功效；在药理上具有抗炎、降血糖、降血脂、利尿等作用，这些药理活性归功于桑叶中的1-脱氧野尻霉素(DNJ)、白黎芦醇等成分，因而研究桑叶中的这两种成分的提取技术具有重要意义。此外，1-脱氧野尻霉素还具有抗病毒、抑制肿瘤等功能。目前，1-脱氧野尻霉素的市场价格昂贵(98％纯度1-脱氧野尻霉素约20万元/克)，如果其生产成本降低，其应用领域还将进一步扩大。微生物发酵可以产生1-脱氧野尻霉素。目前已经发现枯草杆菌、放线菌等微生物可以发酵产1-脱氧野尻霉素。但是它们的产量较低，一般为0.01g/L左右。由于产量极低，目前仅仅局限于菌株初步筛选和改造，没有开展大规模发酵制备1-脱氧野尻霉素的尝试。利用桑树废弃物为原料生产1-脱氧野尻霉素具有巨大的潜力。其优点在于原料来源丰富，价格低廉，是生产1-脱氧野尻霉素等活性物质的理想原料。因此很有必要建立一种高效的1-脱氧野尻霉素提取方法。

目前1-脱氧野尻霉素的提取多采用溶剂提取法和酸提取法。溶剂提取主要采用乙酸乙酯、乙醇和石油醚等溶剂分部提取；而酸提取法主要采用稀盐酸和稀硫酸提取桑叶中的1-脱氧野尻霉素。这些提取方法提取效率和提取率低、成本高。因此，桑树中1-脱氧野尻霉素提取效率较低成为1-脱氧野尻霉素制备的瓶颈问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种从桑叶中提取1-脱氧野尻霉素的方法，该方法工艺简单，易于操作，环保，提取效率高，制备得到的1-脱氧野尻霉素纯度高。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明提供一种从桑叶中提取1-脱氧野尻霉素的方法，包括以下制备步骤：

1)原料处理：取桑叶，去除杂质后，洗净，沥干，粉碎；

2)微波处理：将粉碎后的桑叶放入微波专用容器，设定微波功率为550～750W，温度为35～45℃，时间为6～10min，然后再将桑叶翻动，保持温度不变，设定微波功率为100～200W，调节时间为4～7min；

3)高压处理：将步骤2)得到的桑叶放入高压罐中，加入与桑叶相同重量的纯净水，加压至2.7～4.8kgf/cm²，使其压力均匀，并保持6～10min，恢复常压，得到膏状浆液；

4)浸提：向膏状浆液中加入5～7倍重量份的混合溶液，置于3～7℃，避光，浸提4～7小时，得到浸提液；

5)超声提取：将浸提液进行超声提取，超声波提取处理时间20～35min，作用温度35～45℃，功率为300～400W，得到超声提取液；

6)冷冻：将超声提取液置于3～7℃下，离心15～25min，转速3000～3500r/min，收集沉淀，-14～-20℃冷冻16～19h；

7)融化、浓缩：将上步骤得到的冷冻物取出，加热使之融化，过滤，收集滤液，将滤液进行浓缩成相对密度为1.12～1.23(35℃)的浸膏；

8)将浸膏进行喷雾干燥，包装后即得成品。

优选地，步骤1)中，将桑叶粉碎至150～250目。在这个目数范围内，本发明的1-脱氧野尻霉素的提取率最高。

优选地，步骤3)中，高压处理加压至3.4kgf/cm²。在这个压力下，1-脱氧野尻霉素的提取率最高。

本发明的有益效果在于：

1、本发明在高压处理前，进行微波处理，能够提高提取率，有效降低提取时间。

2、本发明采用高压处理原料，利用各成分对高压的不同承受力而将1-脱氧野尻霉素和其它成分分离出，可以提高提取率。

3、本发明方法中，在超声提取前，先浸提，能够提高提取率，且有效降低提取时间。

4、本发明的方法中，使用高压处理过的甜茶叶来进行提取，而不是直接使用桑叶原料进行提取，有助于提高提取率。

5、本发明采用微波处理、高压技术、浸提、超声提取、离心冷冻和融化技术结合，避免柱层析等技术的使用，节约时间，也避免使用超临界CO₂流体萃取，降低成本，同时还显著提高了1-脱氧野尻霉素的纯度。

6、本发明方法考虑了1-脱氧野尻霉素的稳定性问题，选择低温、避光条件，避免了1-脱氧野尻霉素降解和损耗，提高1-脱氧野尻霉素含量，保持1-脱氧野尻霉素的稳定性。