[发明专利]一种取泪液的方法

说明书

技术领域：

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种取泪液的方法。

背景技术：

泪液是生物体眼表分泌的一种体液，由脂质、多糖、核酸、蛋白质、电解质等等组成。泪液在眼表免疫防御系统中起着重要的作用。随着科技的进步及蛋白质组学的热门，不少重要科研成果发现泪液蛋白质的异常与疾病的发生密切相关，但将泪液分析应用于诊治临床疾病尚有限。究其原因，如何针对微量泪液，采用标准有效方法获得泪液样本是阻碍其应用的关键因素之一。

发明内容：

本发明的目的针对眼球表面，提供一种舒适感好，能够使泪液成份得到最大程度保留的获得泪液的方法。

本发明的取泪液的方法，其特征在于，形状大小适于放置于眼表结膜囊内的聚醚砜膜(PESm)，将此聚醚砜膜放入眼表结膜囊内取泪液，然后再取出聚醚砜膜，通过离心分离而获得泪液。

优选，所述的聚醚砜膜为卵圆形，采用孔径0.45～2.0μm，厚度为0.05～0.5mm的聚醚砜膜，卵圆形的聚醚砜膜长轴和短轴分别为1.0cm和0.5cm。

所述的将此聚醚砜膜放入眼表结膜囊内取泪液，放置时间不少于10min。

本发明采用合适的聚醚砜膜按照本发明的方法取泪液，其生物体舒适感好，并且能够使吸取出来的泪液成份得到最大程度的保留，从而保证各种低丰度或差异蛋白多肽的最大回收。因此本发明为将泪液分析用于眼表疾病的诊断和治疗提供了材料基础。

附图说明：

图1是本发明使用的孔径为0.65μm的聚醚砜膜(PESm65)的3维示意图，；

图2是实施例1中所使用的PESm65，其表面在放大10000倍后的扫描电镜图，呈网孔状；

图3是变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)图与相似性系数图。其中图3A是分别以PESm65与取样滤纸(STP)作采样获得的蛋白电泳图，SDS-PAGE的条带分布代表泪液蛋白的组成；图3B是相似性系数图，数据显示PESm65较STP有优势，即对蛋白成分影响小。

具体实施方式：

以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。

实施例1：

取厚度为0.07mm的0.65μm孔径的卵圆形聚醚砜膜(短轴x长轴＝0.5x1.0cm)，其3维形状如图1所示，表面放大10000倍的电镜图如图2所示。将此聚醚砜膜放入新西兰兔的兔眼结膜囊内，10分钟后取出，置于离心管中，于8000rpm，4℃下离心15min，取出聚醚砜膜，留于离心管中的液体即为聚醚砜膜取样所得的泪液样本，用于后续分析。

以厚度为0.15mm的取样滤纸作为对照(大小相同)，按照上述聚醚砜膜相同的方法取泪液，由此获得用取样滤纸取得的泪液。

比较用聚醚砜膜取得的泪液和用取样滤纸取得的泪液蛋白的差异，具体结果如图3A所示，从图3A的SDS-PAGE图中蛋白条带相似。进一步将二者的条带用软件进行相似性比较，其结果如图3B所示。从图3B的相似性系数可以看出，用聚醚砜膜取泪液较取样滤纸能更好地保留泪液成分。