[发明专利]一种刺激滤泡辅助型CD4T细胞应答的表位组合及其用途

说明书

本发明提供了一种提高滤泡辅助性的CD4T细胞应答的表位组合，其包含T1‑B‑T2或T2‑B‑T1构型排列的表位组合，其中，T1为修饰后的SEQ ID NO：1；B为目标B细胞表位；以及T2为修饰后的SEQ ID NO：2。当此表位组合与B细胞表位串联时，能辅助B细胞表位诱导高水平的特异性抗体应答。此Tfh表位组合用于合成肽或其它类型的疫苗，可提高疫苗的免疫原性。

技术领域

本发明涉及生物制品领域，特别涉及一种刺激滤泡辅助型CD4T细胞应答的表位组合及其在增强抗体水平中的应用。

背景技术

抗体在抗感染免疫中具有重要的作用。抗体直接和病原体结合，阻止病原体感染正常细胞；抗体还可以和细菌毒素作用，阻断毒素作用于靶细胞。此外，抗体也可以吸附于病原体表面，从而激活补体介导的途径来裂解病原体或增进吞噬细胞，如巨噬细胞、嗜中心粒细胞的吞噬作用以及自然杀伤性细胞介导的ADCC作用。另外，抗体，特别是IgG，还可以穿过母体胎盘进入胎儿的循环系统，从而保护胎儿在出生初期免受病原体的感染。因为抗体强大的抗感染作用，不难理解几乎所有上市的人用疫苗保护效力都与抗体水平相关(Vaccines,6th edition,S.A.Plotkin)。

抗体能够抗病原侵袭从而对机体起保护作用，如何提高疫苗的免疫原性从而增强抗体的应答水平成为疫苗研究与开发领域的关键性问题。抗体的分泌细胞称为浆细胞，其来源于活化的B细胞，特别是位于淋巴组织生发中心的B细胞(Germinal Center B cells,GC B)。GC B细胞分化成浆细胞需要抗原的持续刺激。灭活疫苗或亚单位疫苗中的佐剂成分很大程度是通过缓释抗原，从而向GC B细胞提供持续抗原刺激，促进其分化成分泌抗体的浆细胞。除了抗原刺激，GC B细胞还需要激活的、同源性(cognate)的CD4T细胞的“帮助”才能分化成浆细胞。激活的CD4T细胞在不同的免疫微环境下分化成功能和表型不同的亚类，包括TH1、TH2以及TH17等，这些激活的CD4T细胞通常被称为辅助性T细胞(helper T cell,Th)。其中TH1和TH2都具有“帮助”B细胞分化成浆细胞的能力。

最新的研究发现，专业提供B细胞“帮助”的辅助性T细胞是一个不同于TH1和TH2的新型亚类。因该亚类在细胞表面高度表达趋化因子受体CXCR5，受趋化因子CXCL13的招募后，迁移至B细胞滤泡区域而被称为滤泡辅助性T细胞(Follicular helper T cell)。在滤泡区里，活化的Tfh细胞向GC B细胞提供CD40L、ICOS、IL-21等“帮助”信号，确保GC B细胞的存活并促进其分化为浆细胞。而B细胞欲获得Tfh细胞的“帮助”，必须将Tfh的TCR可识别的表位肽段置于MHC II上，并展示在细胞表面供TCR结合以激活Tfh细胞。综上，B细胞分化成分泌抗体的浆细胞，先后需要三个步骤：1)B细胞利用B细胞受体(B cell receptor,BCR)特异性地识别、结合抗原，从而激活BCR信号通路，使B细胞处于活化状态，为随后的细胞增值和浆细胞分化作准备；2)抗原与BCR结合后，以内吞(Endocytosis)的方式被吞入B细胞形成内噬体(Endosomes)，在内噬体低pH条件下，抗原被降解、截断成13-25个氨基酸的短肽，这些短肽被置于B细胞的MHC II分子上，并被转运至细胞表面，供Tfh的TCR识别。3)Tfh的TCR识别B细胞MHC II类分子递呈的抗原后，通过膜上的共刺激分子CD28与B细胞的B7分子结合而活化，活化的Tfh细胞上调表达CD40L，该分子与B细胞膜受体CD40结合进一步刺激B细胞，使B细胞完全活化。所以，诱导较高抗体水平的抗原至少包含两个部分，一个是可供B细胞BCR识别的抗原成分，另外则是可以被TCR识别的T细胞表位，二者缺一不可。