[发明专利]一种驴特征性多肽及其在检测驴皮源性成分中的应用在审
申请号: | 201510649163.7 | 申请日: | 2015-10-09 |
公开(公告)号: | CN105301165A | 公开(公告)日: | 2016-02-03 |
发明(设计)人: | 秦玉峰;周祥山;郝向慧;郭尚伟;段小波;嵇传良;田守生;王静;徐云鹏;史兆松 | 申请(专利权)人: | 东阿阿胶股份有限公司 |
主分类号: | G01N30/89 | 分类号: | G01N30/89 |
代理公司: | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人: | 孙皓晨;马鑫 |
地址: | 252299 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 特征 多肽 及其 检测 驴皮源性 成分 中的 应用 | ||
1.一种驴特征性多肽,其特征在于所述多肽的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。
2.一种检测胶类中药中驴皮源性成分的方法,其特征在于包括:将待检测的胶类中药样品用胰蛋白酶或精氨酸-C酶进行酶切后,取酶解溶液放入液质联用仪,以待检测的胶类中药样品为基质,加入SEQIDNO.1所示的驴特征多肽或阿胶纯品作为对照,采用二级质谱模式,选择三电荷母离子m/z690.8及其子离子的离子对进行监测;如果检测出该离子的保留时间与对照品一致,且其子离子与对照品的子离子一致,则所述样品中含有驴皮源性成分。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述胶类中药包括阿胶、黄明胶、龟甲胶、鹿角胶、狗骨胶以及海龙胶。
4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述的酶切是按照以下方法进行:取0.05g待检测的胶类中药样品于25ml量瓶中,加入少量1%(w/w)NH4HCO3溶液,超声使样品完全溶解,然后用1%(w/w),pH8.0的NH4HCO3溶液稀释至刻度,摇匀,微孔滤膜过滤,精密量取滤液100μl加入2mg/ml的胰蛋白酶溶液10μl,37℃恒温酶解12h。
5.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,液质联用仪检测的液相条件为:采用2.1mm×100mm,1.8μmC18反相色谱柱,流动相A为0.1%(v/v)甲酸溶液,流动相B为乙腈,流速0.3ml/min;梯度洗脱:0~40min,2%~50%B;质谱条件为:电喷雾正离子模式进行多反应监测,选择m/z690.8→752.4,809.5,908.5作为检测离子对进行MRM扫描。
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