[发明专利]一种驴特征性多肽及其在检测驴皮源性成分中的应用在审

专利信息
申请号: 201510649163.7 申请日: 2015-10-09
公开(公告)号: CN105301165A 公开(公告)日: 2016-02-03
发明(设计)人: 秦玉峰;周祥山;郝向慧;郭尚伟;段小波;嵇传良;田守生;王静;徐云鹏;史兆松 申请(专利权)人: 东阿阿胶股份有限公司
主分类号: G01N30/89 分类号: G01N30/89
代理公司: 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 代理人: 孙皓晨;马鑫
地址: 252299 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 一种 特征 多肽 及其 检测 驴皮源性 成分 中的 应用
【权利要求书】:

1.一种驴特征性多肽,其特征在于所述多肽的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。

2.一种检测胶类中药中驴皮源性成分的方法,其特征在于包括:将待检测的胶类中药样品用胰蛋白酶或精氨酸-C酶进行酶切后,取酶解溶液放入液质联用仪,以待检测的胶类中药样品为基质,加入SEQIDNO.1所示的驴特征多肽或阿胶纯品作为对照,采用二级质谱模式,选择三电荷母离子m/z690.8及其子离子的离子对进行监测;如果检测出该离子的保留时间与对照品一致,且其子离子与对照品的子离子一致,则所述样品中含有驴皮源性成分。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述胶类中药包括阿胶、黄明胶、龟甲胶、鹿角胶、狗骨胶以及海龙胶。

4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述的酶切是按照以下方法进行:取0.05g待检测的胶类中药样品于25ml量瓶中,加入少量1%(w/w)NH4HCO3溶液,超声使样品完全溶解,然后用1%(w/w),pH8.0的NH4HCO3溶液稀释至刻度,摇匀,微孔滤膜过滤,精密量取滤液100μl加入2mg/ml的胰蛋白酶溶液10μl,37℃恒温酶解12h。

5.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,液质联用仪检测的液相条件为:采用2.1mm×100mm,1.8μmC18反相色谱柱,流动相A为0.1%(v/v)甲酸溶液,流动相B为乙腈,流速0.3ml/min;梯度洗脱:0~40min,2%~50%B;质谱条件为:电喷雾正离子模式进行多反应监测,选择m/z690.8→752.4,809.5,908.5作为检测离子对进行MRM扫描。

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