[发明专利]一种混合乳酸菌发酵方法有效
申请号: | 201510649363.2 | 申请日: | 2015-10-09 |
公开(公告)号: | CN105400713B | 公开(公告)日: | 2019-04-26 |
发明(设计)人: | 胡晓珂;陈庆彩;李敬龙 | 申请(专利权)人: | 中国科学院烟台海岸带研究所;齐鲁工业大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12R1/225 |
代理公司: | 深圳市科进知识产权代理事务所(普通合伙) 44316 | 代理人: | 宋鹰武 |
地址: | 264003 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 混合 乳酸菌 发酵 方法 | ||
1.一种混合乳酸菌发酵方法,其特征在于,包括如下步骤:
将瑞士乳杆菌和鼠李糖乳杆菌菌种分别进行活化处理,得到瑞士乳杆菌种子液和鼠李糖乳杆菌种子液,所述瑞士乳杆菌菌株的保藏单位名称为中国典型培养物保藏中心,保藏日期为2015年9月15日,保藏号为CCTCC M 2015539,所述鼠李糖乳杆菌菌株的保藏单位名称为中国典型培养物保藏中心,保藏日期为2015年9月15日,保藏号为CCTCC M 2015540;
先将所述瑞士乳杆菌种子液中的瑞士乳杆菌接种至改良的番茄汁肉汤培养基中,培养2h-4h后,再将所述鼠李糖乳杆菌种子液中的鼠李糖乳杆菌也接种至所述改良的番茄汁肉汤培养基,在30℃-37℃的恒温条件下静置培养22h-24h,其中,瑞士乳杆菌和鼠李糖乳杆菌的体积比为1:1-1:2,所述瑞士乳杆菌和所述鼠李糖乳杆菌的总接种量为5%-7%,所述改良的番茄汁肉汤培养基的初始pH值为6.6-7.0,得到发酵后的混合乳酸菌菌液;
所述第一液体培养基、所述第二液体培养基、所述第三液体培养基、所述第四液体培养基、所述第五液体培养基和所述第六液体培养基均为改良的番茄汁肉汤培养基,所述改良的番茄汁肉汤培养基的组分为:
2.如权利要求1所述的混合乳酸菌发酵方法,其特征在于,
将瑞士乳杆菌进行活化处理包括如下步骤,按照8%-10%的接种量,取在-80℃的甘油中保存的瑞士乳杆菌菌种接种至第一液体培养基中培养17h-19h,接着,按照3%-6%的接种量,取所述第一液体培养基中的瑞士乳杆菌菌液接种至第二液体培养基中培养17h-19h,然后,按照3%-6%的接种量,取所述第二液体培养基中的瑞士乳杆菌菌液接种至第三液体培养基中培养17h-19h,得到所述瑞士乳杆菌种子液;
将鼠李糖乳杆菌进行活化处理包括如下步骤,按照8%-10%的接种量,取在-80℃的甘油中保存的鼠李糖乳杆菌菌种接种至第四液体培养基中培养17h-19h,接着,按照3%-6%的接种量,取所述第四液体培养基中的鼠李糖乳杆菌菌液接种至第五液体培养基中培养17h-19h,然后,按照3%-6%的接种量,取所述第五液体培养基中的鼠李糖乳杆菌菌液接种至第六液体培养基中培养17h-19h,得到所述鼠李糖乳杆菌种子液;
将瑞士乳杆菌进行活化处理还包括如下步骤,取所述第三液体培养基中的瑞士乳杆菌菌液涂布到第一平板固体培养基,培养至有菌落长出,接着挑取所述第一平板固体培养基中的单菌落至第七液体培养基,培养17h-19h,然后按照3%-6%的接种量,取所述第七液体培养基中的瑞士乳杆菌菌液接种至第八液体培养基,培养17h-19h后得到所述瑞士乳杆菌种子液;
将鼠李糖乳杆菌进行活化处理还包括如下步骤,取所述第六液体培养基中的鼠李糖乳杆菌菌液涂布到第二平板固体培养基,培养至有菌落长出,接着挑取所述第二平板固体培养基中的单菌落至第九液体培养基,培养17h-19h,然后按照3%-6%的接种量,取所述第九液体培养基中的鼠李糖乳杆菌菌液至第十液体培养基,培养17h-19h后得到所述鼠李糖乳杆菌种子液。
3.如权利要求2所述的混合乳酸菌发酵方法,其特征在于,所述第七液体培养基、所述第八液体培养基、所述第九液体培养基和所述第十液体培养基均为改良的番茄汁肉汤培养基。
4.如权利要求2所述的混合乳酸菌发酵方法,其特征在于,所述固体培养基的组分为:
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