[发明专利]小球藻提取物在花椰菜种子萌发中应用及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及小球藻提取物在农业技术领域的应用，具体涉及小球藻提取物 在花椰菜种子萌发中应用及其制备方法。

背景技术

小球藻(ChlorellaIryrenoidosa)隶属于绿藻门Chlorphyta、绿球藻目 Chloroeoecales、卵囊藻科Oocystaceae、小球藻属Chlorella，为海洋常见单 细胞藻类，具有重要经济价值和巨大的应用和开发潜力。小球藻天然含丰富的 蛋白质、脂质、食用纤维、生物素、纤维素、不饱和脂肪酸、生物活性多糖、 核酸、维生素、微量元素、矿物质、叶酸与叶绿素。这些特殊的有效成分具有 防治消化性溃疡、抗肿瘤、增强免疫、抗辐射、抗病原微生物、防治贫血、降 血脂和抗动脉粥样硬化等保健和药理作用。其干粉的蛋白质含量在50％以上， 是优良的单细胞饲料蛋白源，在饲料中添加能提高肉猪、肉鸡和蛋鸡的生产性 能，应用于水产饲料能提高鱼类生长速度。小球藻提取物以500—1000倍稀释， 喷施于蔬菜、果树等叶面，具有增强植物的光合作用、促使根部生长旺盛、提 高对养分的吸收能力以及提高对细菌的抵抗力的效果。因此，近些年对小球藻 的关注度也越来越高。从小球藻的培养、应用等各个方面都深入研究。专利CN 102586116B公开了“一种普通小球藻及其培养方法和应用”，该发明培养方法 把污水处理和生产生物能源与其他副产品(如，蛋白质、化妆品原料及动物饲 料等)相结合，降低生产成本，达到废物资源的综合利用，实现节能减排的绿 色生产。专利CN103519035B公开了“一种小球藻发酵型果冻的制备方法”该 发明本发明以小球藻为原料，利用其本身具有的高蛋白和天然色素，无需添加 香精及色素，制得的果冻具有天然的绿色，发酵乳的清香，及酸甜适宜的口感， 同时又具有很高的营养价值。根据相关数据得知，近几年来，我国小球藻的研 究热点在小球藻的生物培养、生物柴油以及在保健品、食品方面的研究，在农 业技术领域的研究却寥寥无几。

为了解决上述现有技术的不足之处，本发明的首要目的是提供一种易培养、 易提取的小球藻提取物。该发明提高了花椰菜种子的发芽率、缩短了种子萌发 周期。

本发明的另一个目的在于提供上述小球藻提取物的制备方法。

本发明的再一个目的在于提供上述小球藻提取物在花椰菜种子萌发中应 用。

本发明的上述目的是通过如下技术方案实现：

1、配制葡萄糖液体培养基于120℃、1kpa,条件下高压灭菌1.5h，冷却后 接入小球藻藻种，置于培养箱中光照培养，培养温度25-30℃，培养时间3d后 按1:1比例扩培至试管中，生长至深绿时进一步扩培至100ml锥形瓶中；

2、小球藻提取物的制备：取生长状态良好的小球藻液30mL，密度为2.0× 10⁷CFU/ml，摇匀，离心5min(2500r/min)，离心完毕后沉淀为藻泥。向小球藻 泥中加入95％乙醇制成悬浊液，加入纤维素酶和果胶酶(比例为1:1)2-6ml，酶 解24h,酶解温度25℃。酶解之后进行再次离心，时间10min，转速是4000r/ min。取上清液，减压蒸馏除去乙醇溶剂得小球藻提取物；

3、花椰菜种子的处理与培养：取大小一致，颗粒饱满的花椰菜种子，用2％ 双氧水消毒2遍，蒸馏水冲洗3次，然后均匀置于铺有滤纸的玻璃培养皿中， 加入配制成4％浓度的小球藻提取液至种子完全浸泡，放入保温箱于25℃恒温静 置24h，后置于室温自然光照培养发芽。

所述的葡萄糖液体培养基为：食品工业废水100ml、葡萄糖10.0g、微量元 素。

所述的微量元素为FeC₆H₅0·5H₂03.9g、NaEDTA4.35g、MnCI·4H₂02.188g、 ZnS04·7H₂00.0278g、CoCl·6H200.0687g、CuS0₄·5H₂00.0102g、H₃BO₃0.08g Na₂MoO₄2.0g。

所述的纤维素酶与果胶酶活性之比为1.0万单位：2.0万单位。

经过小球藻提取液的浸泡处理，花椰菜种子发芽率高于95％，发芽周期缩短 2到3天。