[发明专利]一种基于立方钯-八面氧化亚铜-氧化石墨烯构建的T-2毒素传感器的制备方法及应用

权利要求书

1.一种基于立方钯-八面氧化亚铜-氧化石墨烯构建的T-2毒素传感器的制备方法，其特征在于，步骤如下：

（1）依次用1.0、0.3、0.05μm的氧化铝粉末对玻碳电极进行抛光，分别在超纯水和乙醇中超声清洗，氮气吹干；

（2）在电极表面滴加6μL浓度为1~2mg/mL的立方钯-八面氧化亚铜-氧化石墨烯水溶液，干燥；

（3）继续将6μL浓度为5~20μg/mL的T-2毒素抗体溶液滴加到修饰电极表面，于4℃冰箱中孵化1h，清洗干净；

（4）用3μL浓度为5~20mg/mL的牛血清白蛋白溶液封闭非特异性活性位点，于4℃冰箱中孵化1h，清洗干净；

（5）将6μL浓度为0.0001~10ng/mL的一系列不同浓度的T-2毒素抗原用于和抗体的特异性识别，室温下孵化1h，清洗干净，于4℃冰箱中储存备用。

2.如权利要求1所述的一种基于立方钯-八面氧化亚铜-氧化石墨烯构建的T-2毒素传感器的制备方法，所述立方钯-八面氧化亚铜-氧化石墨烯的制备，其特征在于，步骤如下：

（1）立方钯的制备

将105mg聚乙烯吡咯烷酮、60mg抗坏血酸和溴化钾600mg溴化钾加入到4~12mL水溶液中，在80℃条件下持续搅拌10min后，加入1.5~6mL含有57mg的四氯钯酸钠，继续反应3h，离心洗涤后，重新分散在5.5~22mL水中，得到立方钯溶液；

（2）八面氧化亚铜的制备

将1g氯化亚铜溶解在含有6mol/L氯化钠的50~200mL水溶液中，将其和10~40mL的0.6mol/L磷酸钠溶液同时加入到50~200mL水中，随后在60℃条件下搅拌20min，离心洗涤后干燥，得到八面氧化亚铜；

（3）立方钯-八面氧化亚铜-氧化石墨烯的制备

将0.1g八面氧化亚铜和0.1mL三氨丙基三乙氧基硅烷加入5~20mL异丙醇中，室温下搅拌24h，离心洗涤后干燥，得到三氨丙基三乙氧基硅烷修饰的八面氧化亚铜，将0.1g三氨丙基三乙氧基硅烷修饰的八面氧化亚铜和20mg氧化石墨烯加入到25~100mL的水中，随后加入5mL所制备的立方钯溶液，室温下搅拌3h，离心洗涤后干燥，得到立方钯-八面氧化亚铜-氧化石墨烯。

3.如权利要求1所述的制备方法制备的一种基于立方钯-八面氧化亚铜-氧化石墨烯构建的T-2毒素传感器对T-2毒素的检测方法，其特征在于，步骤如下：

（1）使用电化学工作站以三电极体系进行测试，饱和甘汞电极为参比电极，铂丝电极为辅助电极，所制备的传感器为工作电极，在10mL的pH值为6.8的磷酸盐缓冲溶液中进行测试；

（2）选择计时电流法对T-2毒素抗原进行检测，将输入电压设置为-0.4V，取样间隔设置为0.1s，运行时间设置为400s；

（3）当背景电流趋于稳定后，每隔50s向磷酸盐缓冲溶液中注入10μL浓度为5mol/L的双氧水溶液，然后记录电流随时间的变化，绘制工作曲线；

（4）将待测样品溶液代替T-2毒素抗原标准溶液进行检测。