[发明专利]miRNA-199a在抑制成肌细胞的成脂分化试剂中的应用有效
| 申请号： | 201510661354.5 | 申请日： | 2015-10-14 |
| 公开（公告）号： | CN105368834B | 公开（公告）日： | 2018-06-29 |
| 发明（设计）人： | 齐仁立;黄金秀;王琪;王敬 | 申请（专利权）人： | 重庆市畜牧科学院 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/85 |
| 代理公司： | 北京元本知识产权代理事务所 11308 | 代理人： | 黎昌莉 |
| 地址： | 402460 *** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 成肌细胞 分化 试剂盒 应用 生物技术领域 试剂盒使用 辅助育种 遗传标记 脂肪细胞 基因 低表达 肌细胞 可接受 模拟物 靶基 提示 科研 成功 | ||
1.用于抑制成肌细胞转分化为脂肪细胞的试剂盒，其特征在于，包括以下物质：
1)miRNA-199a序列；
2)药学上可接受的miRNA-199a的载体；
miRNA-199a的核苷酸序列为SEQ ID NO：1；
所述成肌细胞为C2C12细胞；所述miRNA-199a的靶基因为Fatp1基因，所述Fatp1基因的核苷酸序列为SEQ ID NO：2。
2.权利要求1所述的试剂盒的体外使用方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)制备miRNA-199a序列；
2)将步骤1)所述miRNA-199a序列整合到所述载体中，得重组质粒；
3)将步骤2)所述重组质粒施用到C2C12细胞或含有C2C12细胞的组织中；
4)检测步骤3)中过表达miR-199后对C2C12细胞生脂转分化情况和Fatp1基因表达水平变化。
3.根据权利要求2所述的使用方法，其特征在于，步骤4)所述检测方法包括组织免疫染色和/或基因芯片和/或Western Blot和/或实时荧光定量PCR检测。
4.根据权利要求2所述的使用方法，其特征在于，步骤4)中检测结果为所述Fatp1基因低表达提示成功抑制成肌细胞的成脂分化，所述检测结果中Fatp1基因表达数据为基准数据的0.5倍以下可视为成功抑制成肌细胞的成脂分化。
5.权利要求1所述的试剂盒在制备遗传标记辅助育种、改善及鉴定肉用品质试剂中的应用。
6.miRNA-199a在制备遗传标记辅助育种、改善及鉴定肉用品质试剂中的应用，其特征在于，所述miRNA-199a的核苷酸序列为SEQ ID NO：1。
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