[发明专利]乳液体系固定化脂肪酶及方法

权利要求书

1.一种乳液体系固定化脂肪酶，由含酶PMO颗粒、特定有机溶剂与磷酸缓冲液构成，所述含酶PMO颗粒位于所述有机溶剂和水相的界面处。

2.根据权利要求1所述的乳液体系固定化脂肪酶，其特征在于，所述含酶PMO颗粒以特定有机硅为前驱体，所述特定有机硅与特定有机溶剂对应关系为下述之一：

(1)当特定有机硅具有式I的结构时，其中，R为烷基或烯基的疏水性基团，特定有机溶剂采用极性在1.0-3.2、与水不互溶的有机溶剂；

(2)当特定有机硅为二(3-(三乙氧基硅基)丙基)二硫或正硅酸烷基酯时，特定有机溶剂采用极性在0.1-1.0、与水不互溶的有机溶剂；

(3)当特定有机硅为聚烷基倍半硅氧烷时，特定有机溶剂采用极性在3.4-4.5、与水不互溶的有机溶剂。

3.一种乳液体系固定化脂肪酶的制备方法，通过包括下述的步骤获得：以特定有机硅为前驱体制备PMO颗粒，并将酶固定在PMO颗粒内，获得含酶PMO颗粒；然后将获得的含酶PMO颗粒置于特定有机溶剂与磷酸缓冲液的混合液中，均质乳化后得到本发明稳定的乳液体系固定化脂肪酶；其中，所述特定有机硅与特定有机溶剂对应关系为下述之一：

(1)当特定有机硅具有式I的结构时，其中，R为烷基或烯基的疏水性基团，特定有机溶剂采用极性在1.0-3.2、与水不互溶的有机溶剂；

(2)当特定有机硅为二(3-(三乙氧基硅基)丙基)二硫或正硅酸烷基酯时，特定有机溶剂采用极性在0.1-1.0、与水不互溶的有机溶剂；

(3)当特定有机硅为聚烷基倍半硅氧烷时，特定有机溶剂采用极性在3.4-4.5、与水不互溶的有机溶剂。

4.根据权利要求3所述的乳液体系固定化脂肪酶的制备方法，其特征在于，所述第(1)组对应关系中，所述具有式I的结构的有机硅中，R优选为C₁-C₅的烷基或C₂-C₅的烯基；更优选的选自1,2-二(三乙氧基硅基)乙烷、1,2-二(三乙氧基硅基)甲烷或1,2-二(三乙氧基硅基)乙烯；所述特定有机溶剂为甲苯或四氯化碳。

5.根据权利要求3所述的乳液体系固定化脂肪酶的制备方法，其特征在于，所述第(2)组对应关系中，所述特定有机硅优选为正硅酸甲酯或正硅酸乙酯，所述特定有机溶剂为庚烷。

6.根据权利要求3所述的乳液体系固定化脂肪酶的制备方法，其特征在于，所述第(3)组对应关系中，所述聚烷基倍半硅氧烷优选为聚C₁-C₅的烷基倍半硅氧烷，更优选为戊基硅倍半硅氧烷；所述特定有机溶剂为乙酸乙酯。

7.根据权利要求3所述的乳液体系固定化脂肪酶的制备方法，其特征在于，所述含酶PMO颗粒的制备过程包括，以特定有机硅为前驱体、聚环氧乙烷-聚环氧丙烷-聚环氧乙烷三嵌段共聚物为模板剂、均三甲苯(TMB)为扩孔剂制备PMO颗粒，并利用吸附法将酶固定在PMO颗粒内。

8.根据权利要求7所述的乳液体系固定化脂肪酶的制备方法，其特征在于，所述扩孔剂与模板剂的质量用量比为1:1-3:1。

9.根据权利要求7所述的乳液体系固定化脂肪酶的制备方法，其特征在于，所述聚环氧乙烷-聚环氧丙烷-聚环氧乙烷三嵌段共聚物优选为P123(EO₂₀PO₇₀EO₂₀)或F127(EO₁₀₆PO₇₀EO₁₀₆)。

10.根据权利要求3所述的乳液体系固定化脂肪酶的制备方法，其特征在于，所述磷酸缓冲液的pH为6.0-8.5，浓度为0.45％-0.95％v/v。