[发明专利]利用转基因微藻生产虾青素的方法有效
| 申请号： | 201510662484.0 | 申请日： | 2015-10-14 |
| 公开（公告）号： | CN105316357B | 公开（公告）日： | 2019-05-28 |
| 发明（设计）人： | 李元广;范建华;房磊;李淑兰;王军 | 申请（专利权）人： | 华东理工大学;嘉兴泽元生物制品有限责任公司 |
| 主分类号： | C12N15/79 | 分类号： | C12N15/79;C12N1/13;C12P23/00 |
| 代理公司： | 上海衡方知识产权代理有限公司 31234 | 代理人： | 卞孜真 |
| 地址： | 200237 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 利用 转基因 生产 虾青素 方法 | ||
1.一种用于生产虾青素的包含微藻表达载体的微藻，其中，微藻为蛋白核小球藻，所述的微藻表达载体为包含β-胡萝卜素酮化酶基因(BKT)和β-胡萝卜素羟化酶基因(CHYB)的载体pGreen0029；所述微藻表达载体包含启动子、终止序列和抗生素抗性基因；所述启动子是蛋白核小球藻的内源性热激蛋白70启动子；所述BKT基因和所述CHYB基因分别连接各自的启动子。
2.如权利要求1所述的微藻，其中，所述BKT基因是克隆自雨生红球藻(Haematococcuspluvialis)的HpBKT基因。
3.如权利要求1所述的微藻，其中，所述CHYB基因是克隆自雨生红球藻(Haematococcuspluvialis)的HpCHYB基因。
4.如权利要求1所述的微藻，其特征在于，所述微藻表达载体通过如下方法构建而得：将BKT基因插入到所述微藻表达载体中，得到包含BKT基因的微藻表达载体(pBKT)；用CHYB基因代替所述包含BKT基因的微藻表达载体(pBKT)中的BKT基因片段，从而得到包含CHYB基因的微藻表达载体(pCHYB)，再将所述载体上的启动子::CHYB::终止序列通过PCR扩增和酶切后，插入到包含BKT基因的微藻表达载体(pBKT)中，从而得到包含BKT基因和CHYB基因的微藻表达载体。
5.如权利要求1所述的微藻，其特征在于，所述微藻制得方法包括构建如所述的微藻表达载体，将所述微藻表达载体转化到微藻中，使得BKT和CHYB基因在转基因微藻中表达，并且催化所述微藻本身的类胡萝卜素生成虾青素。
6.如权利要求5所述的微藻，其特征在于，所述转化方法包括电穿孔法、基因枪法、农杆菌介导法、激光微束穿孔法或玻璃珠法。
7.如权利要求1-6中任一项所述的微藻作为提取虾青素的原材料的应用。
8.如权利要求1-6中任一项所述的微藻在制备动物养殖品、保健食品或化妆品中的应用。
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