[发明专利]使用Ⅲ型NAD激酶提高微藻脂肪酸和油脂含量的方法有效
| 申请号： | 201510662577.3 | 申请日： | 2015-10-14 |
| 公开（公告）号： | CN105316358B | 公开（公告）日： | 2019-05-28 |
| 发明（设计）人： | 范建华;李元广;徐慧;闰从林;房磊;李淑兰 | 申请（专利权）人： | 华东理工大学;嘉兴泽元生物制品有限责任公司 |
| 主分类号： | C12N15/79 | 分类号： | C12N15/79;C12N1/13;C12P7/64;C12R1/89 |
| 代理公司： | 上海衡方知识产权代理有限公司 31234 | 代理人： | 卞孜真 |
| 地址： | 200237 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 使用 nad 激酶 提高 脂肪酸 油脂 含量 方法 | ||
1.一种使用Ⅲ型NAD激酶提高微藻中油脂或脂肪酸含量的方法；
所述方法包括构建包含Ⅲ型NAD激酶的表达载体，将所述表达载体转化到微藻中表达；
所述Ⅲ型NAD激酶是来自拟南芥的AtNADK3激酶；
所述微藻是蛋白核小球藻FACHB-9；
所述表达载体选自表达载体pGreen0029系列载体；
所述表达载体包含启动子，所述启动子选自蛋白核小球藻的内源性HSP70A启动子。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述AtNADK3激酶的基因序列为如SEQ IDNO:1所示的序列。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述AtNADK3激酶的氨基酸序列为如SEQID NO:2所示的序列。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述转化Ⅲ型NAD激酶的微藻中油脂含量提高了至少45％。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述转化Ⅲ型NAD激酶的微藻中脂肪酸含量提高了至少2倍。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述表达载体包含抗生素抗性基因。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述转化方法包括电穿孔法、基因枪法、农杆菌介导法、激光微束穿孔法或玻璃珠法。
8.Ⅲ型NAD激酶在提高微藻细胞中脂肪酸和油脂含量的应用；所述Ⅲ型NAD激酶是来自拟南芥的AtNADK3激酶；所述微藻是包含Ⅲ型NAD激酶的表达载体的蛋白核小球藻FACHB-9；所述表达载体选自表达载体pGreen0029系列载体；所述表达载体包含启动子，所述启动子选自蛋白核小球藻的内源性HSP70A启动子。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述AtNADK3激酶的基因序列为如SEQ IDNO:1所示的序列。
10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述AtNADK3激酶的氨基酸序列为如SEQID NO:2所示的序列。
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