[发明专利]从琼岛染木树中提取分离鸡屎藤苷酸的方法

说明书

本发明公开了一种从琼岛染木树中提取分离鸡屎藤苷酸的方法，具有以下步骤：①将琼岛染木树的茎用乙醇水溶液提取，浓缩提取液后得到乙醇提取物；②将乙醇提取物分散在水中，依次用等体积的石油醚和乙酸乙酯进行萃取，将萃取后剩余的水相部分分散在水中后进行大孔树脂层析，并用乙醇水溶液进行梯度洗脱，对目标流分进行硅胶柱层析，并采用氯仿‑甲醇进行梯度洗脱，得到鸡屎藤苷酸纯度≥50%的粗品；③将鸡屎藤苷酸粗品用甲醇溶解，然后进行硅胶柱层析，并采用氯仿‑甲醇进行梯度洗脱，得到鸡屎藤苷酸纯度≥90%的精制品。本发明的方法开创性的从琼岛染木树中提取有效成分鸡屎藤苷酸，对于琼岛染木树药材资源综合利用具有较积极的意义。

技术领域

本发明属于植物有效成分提取分离技术领域，具体涉及一种从琼岛染木树中提取分离鸡屎藤苷酸的方法。

背景技术

目前，已有文献报道从鸡屎藤中提取分离鸡屎藤苷、鸡屎藤苷酸、鸡屎藤苷酸甲酯等硫代环烯醚萜苷类化合物，其中鸡屎藤苷酸已被证实具有良好的消炎镇痛功效，可用于制备止痛和/或抗炎药物（参见中国专利文献CN101890033A），鸡屎藤苷酸的结构式如下：

。

琼岛染木树（S.merrillii Lo）为茜草科（Rubiaceae）染木树属（Saprosma）植物，是海南岛特有植物品种，在海南省霸王岭等地有分布，目前尚未发现从琼岛染木树提取分离鸡屎藤苷酸的文献报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从琼岛染木树中提取分离鸡屎藤苷酸的方法。

实现本发明上述目的的技术方案是：一种从琼岛染木树中提取分离鸡屎藤苷酸的方法，具有以下步骤：

①将琼岛染木树的茎用乙醇水溶液提取，浓缩提取液后得到乙醇提取物；

②将步骤①得到的乙醇提取物分散在水中，依次用等体积的石油醚和乙酸乙酯进行萃取，将萃取后剩余的水相部分分散在水中后进行大孔树脂层析，并用乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集、浓缩、合并相同流分，对目标流分进行硅胶柱层析，并采用氯仿-甲醇进行梯度洗脱，收集、浓缩、合并相同流分，将鸡屎藤苷酸纯度≥50%的流分干燥后得到鸡屎藤苷酸粗品；

③将步骤②得到的鸡屎藤苷酸粗品用甲醇溶解至浓度为0.1g/mL～1.0g/mL，然后进行硅胶柱层析，并采用氯仿-甲醇进行梯度洗脱，收集、浓缩、合并相同流分，将鸡屎藤苷酸纯度≥90%的流分干燥后得到鸡屎藤苷酸精制品。

上述步骤①中所述的乙醇水溶液的体积浓度为60%～90%，优选75%。

上述步骤①中所述的琼岛染木树的茎为干燥、粉碎后的茎粉末，其粒径为50～200目。

上述步骤②中所述的大孔树脂为D101型大孔树脂，使用前先进行以下处理：先用乙醇浸泡24h；然后先用乙醇反复洗脱至流出液与水按照1∶5的重量比混合后不浑浊，再用水反复洗脱至流出液无醇味；接着用5wt%盐酸洗涤树脂柱并浸泡2～4h，再水洗至中性；最后用2wt%氢氧化钾溶液洗涤树脂柱并浸泡2～4h，再水洗至中性。

上述步骤②中所述的硅胶柱层析用硅胶目数为100～200目，硅胶用量为目标流分的1～1.5倍重量。

上述步骤③中所述的硅胶柱层析用硅胶目数为200～300目，硅胶用量为鸡屎藤苷酸粗品的2～2.5倍重量。